guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

X 2 =
Stato di benessere
[(J4 campione + A campione ) – (J4 controllo + A controllo )] 2
(J4 controllo + A controllo )
Lo stato di benessere rappresenta un valore riassuntivo in quanto, confrontando
la crescita con la maturazione, indica complessivamente la qualità del
campione da analizzare in rapporto alla popolazione di controllo. In questo
calcolo le varie fasi hanno un peso specifico e in particolare, la sopravvivenza
ha un valore di 4, la crescita di 2 e la maturazione di 1.
Stato di benessere = 100 x
(4 x S campione) + (2 x G campione ) + M campione
Considerazioni
Quando si estrae il suolo con M9Y, un’ulteriore sonicazione di 5 minuti della
miscela suolo/M9Y, prima della centrifugazione, può procurare in alcuni
campioni una maggiore tossicità.
Si raccomanda di ignorare o di ripetere il saggio se si osservano i seguenti
risultati:
- meno del 90% della popolazione del controllo riesce a raggiungere lo stadio
adulto;
- più del 10% della popolazione del controllo muore;
- si evidenzia una estesa crescita microbica nelle colture, dannosa per i
nematodi.
Un’estesa crescita microbica o fungina nello stock delle colture M9Y può influire
negativamente sui nematodi. Se si evidenzia, trasferire una quantità di
nematodi in tampone M9 o in M9Y media posti in una capsula Petri in vetro, e
coprire completamente i nematodi con una soluzione di perossido di idrogeno.
Dopo 15 – 20 minuti, i nematodi saranno tutti morti, insieme ai batteri e ai
funghi. Trasferire le femmine morte in una nuova piastra di coltura. Il perossido
di idrogeno non influisce sui piccoli all’interno delle femmine gravide, e in pochi
giorni sarà possibile ottenere una nuova coltura pura di nematodi.
I seguenti criteri sono indicativi delle condizioni di tossicità:
- una sopravvivenza inferiore al 90% del controllo indica la presenza di
sostanze che agiscono su processi biochimici o fisiologici essenziali;
- una maturazione inferiore all’85% del controllo suggerisce la presenza di
sostanze che inibiscono il normale funzionamento genetico dell’organismo
- un accrescimento in lunghezza inferiore al 90% del controllo indica la
presenza di sostanze che agiscono su percorsi biochimici o fisiologici non
essenziali;
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