guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

Organismi di età sincrona
Gli individui di età compresa tra 10 e 12 giorni che vengono utilizzati nei saggi si
ottengono trasferendo gruppi di uova dal contenitori di allevamento ad un
contenitore con suolo artificiale, utilizzando una piccola spatola o un pennellino
fine (o un pelo di spazzola). Dopo 48 ore, rimuovere i gruppi di uova e
alimentare gli individui ottenuti dalla schiusa.
Occorre evidenziare che i gruppi di uova possono essere facilmente raccolti
quando vengono deposti su piccoli frammenti di substrato di allevamento o su
vetrini appoggiati sulla superficie del substrato. Alternativamente, i giovani
collemboli da impiegare nel saggio possono essere ottenuti ponendo alcuni
adulti in piccoli contenitori con gesso di Parigi alla base e permettendo loro di
deporre le uova per un periodo di 2 giorni. Dopo questo tempo, gli adulti devono
essere rimossi dal contenitore. Trascorsi 12 giorni dalla comparsa delle prime
neanidi, gli individui ottenuti dalla schiusa delle uova possono essere utilizzati
nei saggi.
Per assicurare il successo della sincronizzazione, controllare i contenitori per la
produzione delle uova prima di rimuovere gli adulti in quanto, spesso, gli adulti
non rilasciano le uova immediatamente e in due giorni viene prodotto un
numero di uova non sufficiente. In questo caso mantenere gli adulti nei
contenitori di deposizione un giorno in più.
Evitare condizioni di sovraffollamento nei contenitori di allevamento. Come
conseguenza, animali di età di 10-12 giorni possono essere di dimensioni
troppo ridotte e incapaci di produrre un numero di uova sufficiente a soddisfare
le richieste di validità del saggio.
Trasferimento dei collemboli nei contenitori del saggio
I collemboli vengono facilmente trasferiti dal substrato artificiale di allevamento
al suolo artificiale del saggio attraverso un aspiratore automatico o un
insufflatore manuale facilmente costruibile in laboratorio.
2 – Metodo di allevamento con l’uso di corteccia
Sul fondo di un contenitore in vetro disporre uno strato di circa 3-4 mm di carta
bibula e, al di sopra di questo, alcuni frammenti di corteccia di platano[CJ13],
disposti gli uni sugli altri in quantità tale da ottenere uno spessore di circa 4-5
cm. La corteccia di platano deve essere raccolta in aree non inquinate,
accuratamente lavata con acqua deionizzata e sterilizzata per alcuni minuti, allo
scopo di eliminare eventuali sostanze residue, patogeni ed eventuali
invertebrati (es. nematodi, acari). Inumidire la carta e la corteccia con acqua
deionizzata fino ad ottenere una condizione di saturazione. Inserire quindi gli
individui di F. candida e fornire loro cibo come illustrato in precedenza.
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