guida tecnica su metodi di analisi per il suolo ei siti contaminati apat

3.4.2.3 Saggio di tossicità cronica con Heterocypris incongruens
Heterocypris è un genere cosmopolita che include circa 50 specie; nell’area
circum Mediterranea ne sono state descritte più di 30 (Mc Kenzie, 1971,
Martens et al., 2002).
La specie H. incongruens in Italia è stata rinvenuta in risaie, pozze temporanee,
bacini ed estuari di fiumi (Ghetti P.F. e Mc Kenzie K., 1981), è una tra le specie
di Ostracodi che presenta la più alta diversità genetica (Rossi et al., 1998).
Gli Ostracodi sono organismi bentici, si localizzano preferenzialmente
nell’interfacies fra acqua e sedimento, di conseguenza risultano più sensibili,
rispetto ad altri Crostacei, alla tossicità rilasciata dal substrato.
Principio del metodo
Il saggio prevede l’esposizione degli organismi alla matrice solida per 6 giorni e
la valutazione della percentuale di mortalità (effetto acuto) e dell’inibizione della
crescita (effetto cronico) rispetto ai risultati ottenuti con una matrice di
riferimento.
Applicazione
Suoli, sedimenti, fanghi.
Materiali, reagenti, apparecchiature
- Piastre a 12 pozzetti, ∅ 20 mm per espletamento del saggio;
- piastre multipozzetti con parete a fondo sottile (es. a 54 pozzetti a forma
quadrata, lato 10 mm), per le letture dell’accrescimento;
- piastre Petri (∅ 5 cm) per la schiusa, trasferimento Ostracodi e lettura
mortalità;
- matraccio da 1 L;
- parafilm;
- micropipette in vetro per il trasferimento degli organismi;
- microsetaccio a maglie di 100 µm per eliminare le particelle solide alla
fine del saggio;
- incubatore a 25 °C;
- stereomicroscopio;
- sali di grado analitico: MgSO4 ; NaHCO3 ; KCL ; CaSO4 ·2H2O;
- acqua milliQ o equivalente;
- soluzione fissativa Lugol;
- scala graduata trasparente di almeno 1 cm, con suddivisioni di 50 µm;
- cellule algali per nutrimento (Pseudokirchneriella subcapitata);
- spirulina in polvere per il pre-feeding degli Ostracodi neonati;
- matrice di riferimento esente da contaminanti (suolo, sedimento).
Preparazione della Standard Freshwater (Weber, 1993)
Per la preparazione della Standard Freshwater (a durezza moderata)
solubilizzare i seguenti sali di grado analitico in 1 L di acqua Milli-Q o
equivalente:
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