Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten

6. Zusammenfassung
Die Thienopyridine Ticlopidin und Clopidogrel sind seit mehreren Jahren im klinischen Einsatz als
Thrombozytenaggregationshemmer zur Sekundärprophylaxe bei arteriosklerotischen Erkrankungen
der Herzgefäße, zerebralen Gefäße sowie der peripheren Arterien. Trotz ihrer nachgewiesenen
klinischen Wirksamkeit war der Wirkmechanismus lange Zeit auf die Beschreibung als ADP-
Rezeptorantagonist beschränkt. Im Zuge neuerer Erkenntnisse zum Mechanismus der Auslösung
einer Aggregation, insbesondere der ADP-vermittelten Aggregation, sollte im Rahmen dieser
Dissertation der Wirkmechanismus der Thienopyridine genauer untersucht werden sowie mögliche
Auswirkungen auf intrazelluläre Kaskaden, die den aggregationshemmenden Effekt vermitteln. Zu
diesem Zweck wurden die Effekte einer Thienopyridin-Einnahme auf die Thrombozytenfunktion
gesunder Probanden untersucht. In unseren Versuchen bestätigte sich die gute Wirksamkeit der
Substanzen hinsichtlich der deutlichen Reduktion der ADP-vermittelten Aggregation. Vor dem
Hintergrund eines damals neu propagierten Drei-Rezeptoren-Modells für die ADP-vermittelte
Aggregation konnten wir erstmals den Wirkmechanismus an humanen Thrombozyten auf eine
Inhibierung des P2Yac-Rezeptors eingrenzen. Weiterhin konnten wir unter Thienopyridin-Einnahme
eine Aufhebung der ADP-vermittelten Hemmung der PG-E1-vermittelten VASP-(VAsodilator-
Stimulated Phosphoprotein) Phosphorylierung feststellen und somit einen wichtigen Beitrag zum
Verständnis der Wirkung der Substanzen beitragen (48).
Zum besseren Verständnis der zum damaligen Zeitpunkt bereits auf molekularer Ebene bekannten
humanen thrombozytären ADP-Rezeptoren P2Y1 und P2X1 wurden diese aus humanen
Thrombozyten kloniert und mit verschiedenen Tags versehen in einer Astrozytoma-Zelllinine
transient und stabil exprimiert. Es wurden verschiedene zellbiologische Methoden wie
Immunpräzipitation, Durchflusszytometrie und Immunfluoreszenz etabliert, die als Grundlage für
weitere Untersuchungen der intrazellulären Signalkaskaden der Rezeptoren dienen können. Die
stabil exprimierenden Zelllinien dienten zur Verifizierung des pharmakologischen Profils der
Rezeptoren, weiterhin konnten bereits erste Versuche zu einer möglichen Regulation der
Rezeptoren durch zyklische Nukleotide durchgeführt werden. Durch die Etablierung dieser
Zelllininen wurde insgesamt eine gute Grundlage für eine weitere Charakterisierung dieser ADP-
Rezeptoren unter besser standardisierbaren Bedingungen geschaffen.
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