Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten
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4.9 Expression in zellulären Systemen 64<br />
4.9.1 Transiente Expression 65<br />
4.9.2 Immunologischer Nachweis durch Western-Blot-Technik 65<br />
4.9.2.1 Versuch des Nachweis <strong>der</strong> Expression von P2Y1 mittels <strong>der</strong><br />
Western-Blot-Technik 65<br />
4.9.2.2 Nachweis <strong>der</strong> Expression von P2X1 mittels <strong>der</strong> Western-Blot-<br />
Technik 66<br />
4.9.3 Nachweis <strong>der</strong> Expression mittels Immunfloureszenz 67<br />
4.9.3.1 Nachweis von P2Y1 67<br />
4.9.3.2 Nachweis von P2X1 69<br />
4.9.4 Analyse mittels Durchflußzytometrie 69<br />
4.9.5 Stabile Expression – Etablierung von Stabilen Zellinien 71<br />
4.10 <strong>Pharmakologie</strong> <strong>der</strong> stabil exprimierten <strong>Rezeptoren</strong> P2Y1 und P2X1 in<br />
Astrozytoma 1321N1 Zellen 74<br />
4.10.1 Native, nicht transfezierte Astrozytoma 1321N1 Zelllinie 74<br />
4.10.2 Astrozytoma 1321N1 Zelllinie mit stabil exprimierenden P2Y1-VSV-C –<br />
<strong>Rezeptoren</strong> 75<br />
4.10.3 Astrozytoma 1321N1 Zelllinie mit stabil exprimierenden P2Y1-nat –<br />
<strong>Rezeptoren</strong> 78<br />
4.10.4 Astrozytoma 1321N1 Zelllinie mit stabil exprimierenden P2X1-C-<br />
Flag - <strong>Rezeptoren</strong> 79<br />
4.10.5 Versuche zur Regulation des P2Y1-Rezeptors in Astrozytoma 1321N1<br />
Zellen 81<br />
4.10.5.1 Versuche zu einer möglichen Regulation des P2Y1<br />
Rezeptors durch eine Aktivierung <strong>der</strong> cGMP-abhängigen<br />
Proteinkinase 81<br />
4.10.5.2 Versuche zu einer möglichen Regulation des P2Y1<br />
Rezeptors durch eine Aktivierung <strong>der</strong> cAMP-abhängigen<br />
Proteinkinase 83