Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten

gemessen werden, die in ihrer Größe den Signalen der Kontrollmessung entsprachen. Daraus
lassen sich folgende Schlußfolgerungen ableiten:
Die Transfektion der Zellen mit viralen Vektoren beeinträchtigt die Messungen nicht.
Die Inkubation der Zellen mit 8-pCPT-cGMP beeinträchtigt die Messungen ebenfalls nicht.
Die G-Kinase kann in dem System der den P2Y1-Rezeptor heterolog exprimierenden Astrozytoma
Zelllinie 1321 N1 keinen Einfluß auf die Funktion des Rezeptors nehmen, insbesondere kann sie
nicht – wie in Thrombozyten bekannt – das Kalzium-Signal nach Stimulation des P2Y1 durch ADP
inhibieren.
4.10.5.2 Versuche zu einer möglichen Regulation des P2Y1 Rezeptors durch eine Aktivierung
der cAMP-abhängigen Proteinkinase (A-Kinase)
Aus Experimenten mit Thrombozyten ist ebenfalls bekannt, daß nach Zugabe von PG-E1 via
Stimulation der Adenylylcyclase und konsekutiver Erhöhung der cAMP-Spiegel und damit einer
Aktivierung der A-Kinase - eventuell über eine direkte Phosphorylierung - eine Inhibierung der
Kalzium-Freisetzung auftritt. Der genaue Mechanismus ist auch hier ungeklärt.
Die A-Kinase ist in den meisten Zellen exprimiert, und auch die Astrocytoma Zelllinie verfügt über
eine endogen exprimierte PKA, welche durch PG-E1 akitviert werden kann, da erhöhte cAMP-
Spiegel nach PG-E1-Stimulation mittels RIA nachgewiesen werden konnten (Daten nicht gezeigt).
Ebenso konnte nach PG-E1-Stimulation eine VASP-Phosphorylierung mittels Western-Blot gezeigt
werden (Daten ebenfalls nicht gezeigt).
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