Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten

verhindert wird (140;164). Beide Substanzen heben die intrazellulären Konzentrationen der
zyklischen Nukleotide cGMP und cAMP an: NO und NO-freisetzende Substanzen wie
Natriumnitroprussid (SNP) erhöhen über eine direkte Aktivierung der Guanylylzyklase die
thrombozytäre cGMP-Konzentration, während PG-I2 und andere Prostaglandine, z.B. das in der
vaskulären Therapie eingesetzte Prostaglandin E1 (PG-E1), zuerst an den Prostaglandinrezeptor
binden. Dieser wiederum aktiviert dann über die α-Untereinheit seines Gs-Proteins die
Adenylylzyklase, was dann zur Bildung von cAMP führt. Abgebaut werden cGMP und cAMP durch
Phosphodiesterasen, die von diesen wiederum in positiven oder negativen Feedback-Schleifen
gehemmt oder aktiviert werden (34;140).
Die zyklischen Nukleotide entfalten ihre antiaggregatorische Wirkung hauptsächlich über die cAMPund
cGMP-abhängigen Proteinkinasen (cAMP-PK und cGMP-PK) (15;50;126;160). Diese Kinasen
phosphorylieren eine Reihe von Proteinen und vermitteln dadurch die Hemmung verschiedener
Plättchenfunktionen: Es kommt zur Inhibierung des Kalziumsignals, der Adhäsion, der
Fibrinogenbindung und der Aggregation.
Zahlreiche Substrate der cAMP-PK und der cGMP-PK in Thrombozyten wurden bereits identifiziert
(140), darunter das Vasodilatator-stimulierte Phosphoprotein (VASP) (58;158).
VASP, ein Zytoskelett-assoziiertes Protein, ist das am besten charakterisierte Substrat beider
Kinasen (14;145). Es ist in fast allen Zelltypen exprimiert, lokalisiert dort vor allem in fokalen
Kontakten, an Streßfasern und den Zell-Zell-Kontakten (116). Zahlreiche Interaktionen von VASP
mit Zytoskelettproteinen wie Profilin, Zyxin, Vinculin und Aktin sowie dem Oberflächenprotein ActA
des humanpathogenen Bakteriums Listeria monocytogenes (20;115;117;118) sind beschrieben
worden. VASP besitzt drei Phosphorylierungsstellen – Serin-157, Serin-239 und Threonin-278 – ,
die mit verschiedenen Kinetiken von der cAMP-PK und cGMP-PK phosphoryliert werden (14;145).
Die Aktinpolymerisation und die Bündelung von Aktinfilamenten werden durch VASP verstärkt (6).
Zusammen mit anderen Faktoren ist es vermutlich an den Umbildungen des Zytoskeletts beteiligt,
die in Thrombozyten zur Aktivierung des Fibrinogenrezeptors führen. Interessanterweise liegt VASP
in Thrombozyten in sehr hoher Konzentration vor (33). Es konnte gezeigt werden, daß die
Phosphorylierung des Serin-157, die man aufgrund einer Verschiebung des apparenten
Molekulargewichts von VASP von 46 kDa nach 50 kDa in SDS-Polyacrylamidgelen detektieren
kann (59), in Thrombozyten eng mit der Hemmung des Fibrinogenrezeptors korreliert (70).
Darüberhinaus zeigen Versuche mit Thrombozyten von VASP-knock-out-Mäusen, daß deren durch
niedrige Konzentrationen zyklischer Nukleotide ausgelöste Hemmung der Aggregation gestört ist.
Außerdem reagieren diese Thrombozyten mit verkürzter Aggregationszeit nach Stimulation mit
Kollagen und mit verstärkter Aktivierung des Fibrinogenrezeptors und P-Selektin-Expression nach
Stimulation mit Thrombin (4;63). Diese Beobachtungen weisen darauf hin, daß die
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