Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten
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3.9.6 Transiente Transfektion adhärenter Zellen 35<br />
3.9.6.1 Transfektion mit Hilfe <strong>der</strong> Calcium-Phosphat-Methode 35<br />
3.9.6.2 Transfektion mit FuGENE 6 und Lipofectamine 36<br />
3.9.7 Durchflußzytometrie 36<br />
3.9.8 Immunpräzipitation 37<br />
3.9.9 Indirekte Immunfluoreszenz 37<br />
3.10 Methoden Calcium-Einzelzell-Messungen 38<br />
3.10.1 Zellpräparation 38<br />
3.10.2 Messungen 39<br />
4. Ergebnisse 40<br />
4.1 Durchführung <strong>der</strong> Thienopyridinstudien 40<br />
4.2 Ergebnisse <strong>der</strong> Aggregationsmessungen 42<br />
4.2.1 Festlegung <strong>der</strong> Konzentrationen für <strong>ADP</strong>, U-46619 und Thrombin für die<br />
ex vivo durchgeführten Aggregationsmessungen 42<br />
4.2.2 <strong>ADP</strong>-induzierte Aggregation 42<br />
4.2.2.1 Normaler Verl<strong>auf</strong> einer <strong>ADP</strong>-induzierten Aggregation 42<br />
4.2.2.2 Verl<strong>auf</strong> einer <strong>ADP</strong>-induzierten Aggregation nach Einahme von<br />
Ticlopidin o<strong>der</strong> Clopidogrel 43<br />
4.2.2.3 Wirksamkeit von Ticlopidin und Clopidogrel 43<br />
4.2.2.4 Zeitverl<strong>auf</strong> <strong>der</strong> Ticlopidin-Wirkung 44<br />
4.2.3 Synergistische Effekte von <strong>ADP</strong> und Epinephrine 45<br />
4.2.4 Thrombin- und U46610-induzierte Aggregation 45<br />
4.3 Ergebnisse <strong>der</strong> intrazellulären Calciummessungen in <strong>Thrombozyten</strong> 46<br />
4.3.1 Festlegung <strong>der</strong> Konzentrationen für <strong>ADP</strong>, U-46619 und Thrombin für<br />
die ex vivo durchgeführten Calciummessungen 46<br />
4.3.2 Normaler Verl<strong>auf</strong> einer <strong>ADP</strong>-induzierten Calcium-Freisetzung aus<br />
intrazellulären Speichern von <strong>Thrombozyten</strong> 46<br />
4.3.3 Normaler Verl<strong>auf</strong> einer <strong>ADP</strong>-induzierten Cacium-Freisetzung aus<br />
intrazellulären Speichern von <strong>Thrombozyten</strong> und einem zusätzlichen<br />
Einstrom von extrazellulärem Calcium 47<br />
4.3.4 Verl<strong>auf</strong> <strong>der</strong> <strong>ADP</strong>-induzierten Calcium-Freisetzung aus intrazellulären<br />
Speichern von <strong>Thrombozyten</strong> während <strong>der</strong> Einnahme von Ticlopidin<br />
o<strong>der</strong> Clopidogrel 47