Pharmakologie der ADP-Rezeptoren auf humanen Thrombozyten

eine Xho I-Schnittstelle und die für das VSV-Epitop kodierende Sequenz enthält, mittels PCR
amplifiziert. Das PCR-Produkt wurde mit BamH I und Xho I geschnitten und in den ebenfalls mit
BamH I und Xho I geschnittenen Vektor pcDNA3 ligiert. Verschiedenen Klone wurden sequenziert
und ein korrekter Klon mit (pcDNA3-) P2Y1-VSV-C bezeichnet.
4.7.4 Klonierung eines Expressionsvektors ohne Tags für P2Y1 (P2Y1-nat)
Beschreibung: Im Fall des P2Y1 wurde auch ein Expressionvektor kloniert, der nur die cDNA von
P2Y1 enthält. Als Vektor wurde wiederum pcDNA3 mit den Schnittstellen BamH I und Xho I
eingesetzt.
Konstruktion: Zur Herstellung des Plasmids wurde die P2Y1-cDNA mit den Primern GIK 154, der
eine BamH I-Schnittstelle und eine nach Kozak (80) optimierte Sequenz enthält, und GIK 155, der
eine Xho I-Schnittstelle enthält, mittels PCR amplifiziert. Das PCR-Produkt wurde mit BamH I und
Xho I geschnitten und in den ebenfalls mit BamH I und Xho I geschnittenen Vektor pcDNA3 ligiert.
Verschiedenen Klone wurden sequenziert und ein korrekter Klon mit (pcDNA3-) P2Y1-nat
bezeichnet.
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