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Análisis de la expresión de 103 ORFs de función desconocida en S cerevisiae 118 Tabla 4.4. Valores de Nivel Relativo (N.R.) y Absoluto (N.A.) correspondientes a las hibridaciones de los RNAs extraídos en diferentes condiciones de cultivo (1-YPGE, 2-YPD, 3-YPD/fase estacionaria, 4-YNBgIu/privación de aminoácidos, 5-YNBgIu/privación de nitrógeno, 6-YNBgIu/choque osmótico, 7-YNBgIu/23°C, YNBgIu/36°C) con sondas específicas de 103 ORFs de función desconocida en los cromosomas VII y XIV de S. cerevisiae. (A.E.: Actividad Específica de las sondas en x106de cpm/µg de DNA, ND: No Determinado,
• • RESULTADOS Y DISCUSIÓN El análisis de Northern realizado con las 103 ORFs de los cromosomas VII y XIV de S. cerevisiae, permitió detectar la expresión de 86 ORFs (83,5%). Para cinco de ellas (4,9%), no fue posible visualizar una señal de hibridación (G2850, G3719, N1785, N1795 y N1872). Por otro lado, once ORFs (10.7%) presentaron dos transcritos de tamaño compatible con el de la secuencia de la ORF correspondiente (G2889, G3189, G3193, G3406, G3435, G3535, G3540, G7826, N1735, N1743 y N1777) no siendo posible descartar uno de los dos. Finalmente, una ORF (G8541) presento varios transcritos. 4.4. Niveles absolutos de expresión: Los Niveles Absolutos de cada ORF (N.A.) se calcularon refiriéndolos al nivel de expresión de ACTI en la condición de cultivo número 2 tal como se describe en Materiales y Métodos. 4.4.1. Clasificación de las ORFs en función de su nivel absoluto: Con los valores de nivel absoluto calculados se realizó una clasificación de las distintas ORFs en función de sus niveles de expresión (Tabla 4.5.): Alta expresión: N.A. > - 0.5 Mediana expresión: - 0.1 < N.A. < 0.5 Baja expresión: N.A. < 0.1 No detectable: ausencia de señal. Aquellas ORFs en las que no fue posible identificar un único transcrito de manera inequívoca se excluyeron de la cuantificación (MT). 119
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