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Análisis de la expresión de 103 ORFs de función desoonocida en S. cerevisiae encontrados por otros autores que han analizado otras ORFs de función desconocida en otros cromosomas de la levadura. Es de destacar la incapacidad de cualquiera de los métodos utilizados para detectar la totalidad de las ORFs analizadas. Aún exceptuando el mapeo transcripcional del cromosoma XI (Richard et al., 1997) que no fue capaz de detectar la expresión de casi la mitad de las ORFs pronosticadas por la secuenciación, los otros tres métodos no pudieron detectar la expresión de una proporción significativa de las ORFs estudiadas. También es interesante observar la variabilidad de resultados obtenidos, usando los mismos criterios y la misma tecnología, en cuanto a la distribución de ORFs en los diferentes grupos de niveles absolutos de expresión en los cromosomas II, IV, VII, X, XII, XIV y XV, destacándose principalmente variabilidad en el porcentaje de ORFs que no pudieron ser cúantifl ĉadas en cada caso (del 13,8% a137,3%). Todos estos cromosomas han sido analizados en el consorcio B2 de EUROFAN con el que colabora nuestro laboratorio. Si estos datos se confirman una vez analizados la totalidad de los genes de la levadura, estas diferencias podrían reflejar un aspecto funcional en lo que se refiere a la comprensión de los procesos evolutivos que llevaron a la organización actual del genoma de S. cerevisiae. Contrastando los datos presentados en la tabla 4.5, con los que proporciona el estudio teórico de las secuencias nucleotídicas y relacionándolos con la información disponible en la literatura podemos sacar algunas conclusiones en cuanto a la distribución de las 103 ORFs analizadas en los cuatro grupos de niveles absolutos de expresión: 122 • • • •
• • • • 4.4.1.1. ORFs cuya expresión no fue detectada: RESULTADOS Y DISCUSIÓN Cinco ORFs no presentaron ninguna señal de hibridación en los Northern realizados (N1785, N1795, G2850, G3719 y N1872); la incapacidad para detectar la expresión de e ŝtas ORFs puede ser debida a diversas circunstancias: a- La sensibilidad de la técnica es inferior al nivel de expresión. Esto es aplicable para aquellas ORFs que se expresan a niveles inferiores al 1% del nivel de ACTI . b- Entre las condiciones analizadas en este trabajo, no se encuentra(n) presente(s) aquella(s) en las que la ORF se expresa. c- O finalmente que la ORF aparece en la secuencia por casualidad y no se corresponde con un gen funcional. En el caso de las ORFs G2850 y N1872, existen datos que indican que se trata de genes funcionales; G2850 codifica una proteína que presenta similitudes con la proteína hipotética C3H1.12C de S. pombe y que contiene en su secuencia un motivo característico de peptidasas señal tipo I. En el análisis funcional, realizado en nuestro laboratorio, se pudo comprobar que las colonias derivadas de una espora portadora de la ORF interrumpida crecen más lentamente y son de menor tamaño que las silvestres, lo que revela un fenotipo asociado a su función (Tizón et al., 1998, enviado). Recientemente, N1872 ha sido identificada como el gen TEPI que codifica una tirosin- fosfatasa y que presenta similitudes con el gen supresor de tumores humanos TEPI/MMAC/PTENI (Li et al., 1997). Aunque no existen datos sobre la funcionalidad de G3719 en S. cerevisiae, su homología con otras proteínas funcionales de levadura o de 123
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• • El presente trabajo: Análi
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* • Por las numerosas imperfeccio
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• • • ^ 1. INTRODUCCIÓN ÍND
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