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o<br />
Ó^,<br />
MATERIALES Y MÉTODOS<br />
Tabla 3.3. Diseño de los cebadores para las reacciones de amplificación y selección de las<br />
enzimas utilizadas en la comprobación de cada producto obtenido Tm: temperatura de<br />
melting, L.P.: Longitud del producto de PCR; L: longitud del cebador. (continuación).<br />
Nombre<br />
del<br />
Cebador<br />
Posición del<br />
Cebador<br />
Inicio final<br />
SECUENCIA (ó^ (nt) ^^ Enzima<br />
Longitud<br />
Fragmentos<br />
(pb)<br />
,<br />
.<br />
,G31^10 3^1^1Ot5' ' `313 ŜÓ9^ 3^13'Ŝ28; GCTCTGGCCGTCGTTGGAAC<br />
" (3,5 20 65'Ŝ PvúI1 _. ... 376^278 . .:<br />
3"110 `,3' ^314^163, 31'41x42 GACACGGACCAAACTTCGCC:AT_ 62,1. 22 : _ '<br />
G3113 3113-5' 315037 315058 CCAAGGAGGCCTGAATGGAACG 64,0 22 588 B 111 356+231<br />
^'G3116<br />
3113-3'<br />
YGL98 183<br />
315624 315603 ACCGGGCAGAGGTGGCAATAAA<br />
_<br />
.<br />
62,1<br />
317522 3175"42 ^GCAAACAAAACATGACGCCCA 57;9<br />
22<br />
2i<br />
, ..<br />
336<br />
.<br />
C1iiI 253+82<br />
YGL98-498 ' •31^7857 3^17837; GĈTCCTTGCTTCAAACTGCCC 61;8 21 ^ "<br />
G3146 3146-5' 325369 325383 GCCCCCAATCCAGGT 47 4 15 333 H aI 202+131<br />
^Ĝ3168:<br />
3146-3'<br />
. ..<br />
3.,1`68'=5'<br />
.<br />
3_168;'-'3'<br />
325701<br />
..<br />
325687<br />
_<br />
334895<br />
..<br />
334915;<br />
33550.4; 335483<br />
_<br />
CGGGCTGCGAAGAAG<br />
CGAAAGAAGCCGGAITGGGGG<br />
.<br />
TGTTfCĈTCTGGCACTGCCTCG<br />
47,4 15<br />
61=8 2^1<br />
_<br />
64;0, ' 22<br />
_ _<br />
61U:<br />
"<br />
,.<br />
Cl^il<br />
^<br />
364^213+40,;:<br />
G3175 3175-5' 342661 342646 CCGTCCATGAATCGAA 49,2 16 479 Dral 336+142<br />
,G31^79<br />
3175-3'<br />
..<br />
3^1:79.=5'<br />
342183 342197<br />
34370..7 343722;<br />
CGGAACAGACCCCAA<br />
TTGG^GTGAATCGGCGÁ<br />
50,6<br />
47,8"<br />
15<br />
1'6 374 .- HiiidLll<br />
^" 20.:4,+170<br />
3179=3'^ 344080 344065' GGCTITTGCACTTCCG ,46;6 16.,, " ^ ' ^ _ . ^ -<br />
G3189 3189-5' 346762 346747 AAGGGTTTGGTCCAGA 41,5 16 341 Ncol 267+73<br />
.. ...<br />
: G3f93<br />
3189-3'<br />
.<br />
3:193=5'<br />
31:93:-3'<br />
346422<br />
. ...<br />
346436<br />
. ..<br />
35,O1Q6<br />
.<br />
35Q12.1;<br />
.<br />
350418 3504Q3..<br />
.<br />
CTTCGGTTGACGCAA<br />
. .<br />
AAĈCCAGCTCAÁGCCrT<br />
_<br />
CACCAGGCGTT.TCAAA<br />
42,3<br />
.<br />
44;8.<br />
44;0:<br />
15<br />
-<br />
".:<br />
16<br />
..<br />
1^6<br />
-<br />
313<br />
. ,^<br />
Fliñĉl711. 158+'1:30±25<br />
G3210 3210-5' 361452 361437 ACGCCTATTCAAGCCG 51,7 16 488 EcoRl 271+217<br />
.G3406^:<br />
3210-3'<br />
.<br />
3406=5'<br />
360965 360980<br />
: .<br />
3,79Q58 379073;<br />
GGCCAGGTAGCGGTAA<br />
. ..<br />
CCÁGGCGÁGTACCCAA ^<br />
54,3<br />
46 3;<br />
16<br />
".<br />
.16 433.,<br />
" . ._<br />
EĉóRl ,<br />
.<br />
369±;^63 .<br />
3406`3' . 37949;b 3,7.947Ŝ: TACÁCCT'TGCCĈĜGÁG 46,5; 16 " ^ "<br />
G3432 YGL061c5' 389597 389577 CAGGAGGTGGAGCAAGCGATA 61 8 21 551 Alul 272+235+43<br />
'G3435"<br />
YGL061c3'<br />
3435:'S'<br />
389047 389066<br />
...<br />
390456 390471;<br />
CGAGGCAGGAACATGGGTCT<br />
,<br />
= CTCCGG^IGATT,GGGCA<br />
61,4 20<br />
"<br />
49,2^ , lb<br />
.<br />
58;1 Cl^il<br />
.....<br />
443^1^38<br />
3„43Ŝ=3' ; 391Q36 391021; GGCCGGGTTCt^TGAG^ 48,9, "16.,., ^ . - " , -<br />
G3474 3474-5' 401283 401268 TGGGTGCTTGGTTATT 46 6 16 318 H al 190+128<br />
3474-3' 400966 400981 CCCTTI'rATGTTTGCC 46,6 16<br />
Ĝ3483 3483-5'<br />
34,83=3'<br />
402635,<br />
..:<br />
,4U2v65Q;<br />
_.<br />
403055 403U4.1:<<br />
AAĈĈCGGTGGATATT'T<br />
.<br />
C,GGTGGĈAATCITCA<br />
46,6<br />
: .__<br />
47;8<br />
_ 16;: 42'1 - IV"dél .. 2, 50^1^1<br />
,.<br />
.<br />
^<br />
1_5<br />
"<br />
G3489 3489-5' 404038 404053 CCGGCAGTAGAAGGGA 54,3 16 330 Clal 321+9<br />
G3505<br />
3489-3'<br />
^<br />
3,SOS=S'<br />
404367 404352<br />
405776 ,.405791,;.<br />
CGCATCGATATTGGGA<br />
, GCTGC.GĈY^GAÁTGCCT<br />
49,2 16<br />
Ŝ0,0. ^ 16 542 1Í^16qÍ 281^147+114<br />
35Q5.-3' 406317 406302:": CCGAGCĜGTACGTCCÁ ŜU,S T6:^. ..:" . . .<br />
G3517 3517-5' 411580 411595 TTACGTGTGGGGCAAC 44 3 16 329 EcoRl 273+56<br />
3517-3' 411908 411893 CGTTCCAGCGTGTGAT 44,1 16<br />
G3535 3Ŝ35=5' 4,1454'1 4,14556'; CCACGAGGCAGAGG ,A'A , 46,3 1:6 330 ,Yhól 172±T58 _<br />
3535;:3' , 414870 4,1,4855; ._ ,GG.GĜGAC,"CJ,TCTTGGAG 47,^3, 16__ .<br />
G3540 3540-5' 415140 415155 GCCCCTTGATGCATTT 45,6 16 535 Alul 320+215<br />
_,<br />
G3679.<br />
3540-3'<br />
3679.,, Ŝ'<br />
..<br />
3679'3' ^.<br />
415527 415512<br />
45169.4<br />
.:<br />
:4516;7,9.<br />
.<br />
45,1223 451237;<br />
TGAGGATTGGGATGGG<br />
.<br />
AGCTCGGTGAAĜGC^Á<br />
^<br />
- TGATGCGGCGGTTTC<br />
45,6<br />
..<br />
49,0<br />
,4,8,4<br />
16<br />
16..<br />
15<br />
.<br />
472 .<br />
: .<br />
^^ ^<br />
.<br />
, .<br />
ĉiLUl<br />
, `<br />
_..<br />
385±8,7..<br />
G3690 3690-5' 457856 457841 CAGCAGCGGTAGCGAT 47,2 16 499 EcoRl 350+149<br />
G3,719:<br />
3690-3'<br />
37,19,5'<br />
37-19=3'<br />
457358 457373<br />
-<br />
.<br />
4683U.0 468315;;<br />
468739, 468724;<br />
CCAAATTTGCCCTCCA<br />
_ _<br />
.^; GGGTGTTGCGTTTTĜĈ<br />
"<br />
; ACĈAGTAAAGGCGCĈA<br />
46,6<br />
"<br />
51,7<br />
^<br />
5;1,7<br />
16<br />
,..<br />
l'6<br />
16<br />
44Q<br />
,.: ^<br />
_ _ .<br />
Bám'Fll<br />
. -<br />
.<br />
342±98<br />
G3759 3759-5' 490476 490461 GTTCCCCATGCATTCG 46,6 16 510 Hindlll 258+252<br />
3759-3' 489967 489982 ATCTGTCCCCGTGCTG 45 9 16<br />
47