Untersuchung von Cyclodextrinkomplexen - OPUS - Universität ...

56 Material und Methoden
4.3.4.3 Bestimmung der Löslichkeitssteigerung in Abhängigkeit vom pH-Wert
Die in Kapitel 4.3.4.2 beschriebene Methode wurde unter Verwendung von zwei
Phosphatpuffern mit pH 4,0 und pH 9,0 (vgl. Kap. 4.3.3) durchgeführt. Um die höhere
Löslichkeit der sauren Arzneistoffe zu berücksichtigen, wurde deren Einwaage im
Überschuss entsprechend angepasst. Analog wurde nach den Gleichungen 4.6 und 4.7 die
Löslichkeitssteigerung berechnet.
4.3.5 Kernspinresonanzspektroskopische Versuche
4.3.5.1 Job’s Plots zur Bestimmung der Komplexstöchiometrie mittels NMR-Spektroskopie
Von jedem Arzneistoff wurden eine Lösung in 0,1 M - Phosphatpuffer pH 6,5 und eine
β-Cyclodextrinlösung gleichen molaren Gehalts hergestellt. Die beiden Lösungen wurden in
verschiedenen Verhältnissen gemischt, sodass die molaren Verhältnisse (Wirt zu Gast) von
4:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3 und 1:4 (für SGD abweichend) vorlagen, die Gesamtmolarität
jedoch über alle Proben hinweg konstant blieb. Die Höhe der Konzentration richtete sich
nach der Löslichkeit der Arzneistoffe [55,107,159]:
Tab. 4.2: Konzentrationen der Probenlösungen für die Job’s Plots
Gast SDZ SDD SFZ SGD SMR SMT SMZ SNA STZ
Konzentration [mmol/l] 0,3 1,0 1,0 4,0 0,3 0,3 1,0 1,0 1,0
Das Ansatzvolumen betrug jeweils 4 ml. Die Lösungen wurden in Vials gefüllt, mit flüssigem
Stickstoff eingefroren und in einem Christ Alpha 1-4 Lyophilisator gefriergetrocknet. Nach
Prozessende wurden die Lyophilisate in 4 ml Deuteriumoxid (99,92 % D, Deutero GmbH,
Kastellaun) aufgenommen und gelöst. Der Ansatz wurde wiederum gefriergetrocknet. Dieses
Vorgehen wurde für alle Proben mindestens dreifach durchgeführt. Anschließend wurden die
verschlossenen Proben im Exsiccator über Blaugel unter Vakuum und Lichtausschluss
gelagert. Zur Vermessung wurden die Ansätze wiederum in 4ml D2O aufgenommen. 0,75 ml
wurden in Schott Economic ® Probenröhrchen überführt. An einem Bruker Avance III (400
MHz) mit BBO (broadband observer) wurde bei 298 K ein eindimensionales 1 H-NMR-
Spektrum aufgenommen. Die genauen Parameter der Messungen befinden sich im Anhang
8.2.7.2. Die Auswertung erfolgte mit der Software Bruker Topspin ® [160]. Da keine
Referenzsubstanz zugesetzt worden war, wurden die erhaltenen Spektren anhand des
HDO-Signals quantifiziert. Die Zuordnung der einzelnen Peaks zu den Protonen erfolgte
anhand von Angaben in der Literatur [100,185] (s. Anh. 8.2.7.1). Das Ausmaß des Shifts der
chemischen Verschiebung Δδ (s. Kap. 2.4.4) der H3- und H5-Signale von β-Cyclodextrin und
aller Signale des Gastes wurde gemessen. Das Produkt aus Δδ und dem Molenbruch X der
jeweiligen Komponente wurde gegen den Molenbruch X aufgetragen [107,159]. Aus Zeitund
Kapazitätsgründen am Messgerät wurden nur Einfachmessungen durchgeführt.