Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...

Material und Methoden 101
Druckkammer
Um Absorber im Mikrometerbereich auf Temperaturen wesentlich über 100◦C zu erhitzen, wurden die Proben unter statischen Druck gesetzt. Es wurde eine
Druckkammer aus Plexiglas konstruiert, die eine Wandstärke von 15 mm besitzt
und einen Innenraum von 100·50·40 mm bietet. Für die Bestrahlung wurden die
Probenplatten in der Kammer mit Stickstoff unter Druck bis zu 10 bar gesetzt.
Dadurch kann nach der Zustandsgleichung von Wasser (siehe Abbildung 2.6)
ein Sieden in den Proben unter 180◦C verhindert werden. Die Druckkammer
wurde statt der Klimakammer während der Bestrahlung über dem Laserstrahl
positioniert. Abbildung 3.35 zeigt die beschriebene Druckkammer.
Abbildung 3.35: Druckkammer zur Bestrahlung der Proben, die mit Gas unter
max. 10 bar Druck gesetzt werden kann.
Zur Bestrahlung der Konjugate wurde eine 600 µm Faser durch das Plexiglas und
die Probenplatte auf den Probenplattenboden abgebildet. Zur Bestrahlung wurde
der Ti:Sa mit einer Pulsdauer von 15 µs eingesetzt. Die Bestrahlung erfolgte 5 min
nachdem die Kammer unter Druck gesetzt wurde, damit sich der Stickstoff in den
Proben lösen konnte. Nach der Bestrahlung wurde die Probenplatte geöffnet,
um 2 µl des jeweiligen Enzym-Substrats hinzuzugeben. Die Enzymaktivität der
Proben in der Probenplatte wurde ohne Druckkammer mit der Positioniereinheit
der Klimakammer gemessen.