Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...

Ergebnisse 157
4.6.3 ZelluläreEffekteinnerhalbvon24h
Da der Schaden eine hohe räumliche Präzision und die Reaktionsprodukte nach
der Bestrahlung keinen zytotoxischen Einfluß auf die Zellen haben sollten, wurden
die Zellen in allen folgenden Experimenten nach der Inkubation nicht mehr
gewaschen. Die Goldkonzentration in dem Probenpuffer war damit in den Proben,
in denen keine Konjugate an die Zellen binden sollten, so hoch, dass sich
ca. 1000 Konjugate in einer Entfernung von 100 nm zur Zelloberfläche befanden.
Da es in allen Versuchsreihen eine kleine Anzahl überlebender Zellen gab, stellte
sich die Frage, ob diese Zellen durch zeitverzögerte Effekte sterben. Entsprechend
wurden in einer Versuchsreihe die Zellen nach der Bestrahlung in 96-Well-Platten
unter Kulturbedingungen aufbewahrt und 24 h später untersucht. Innerhalb dieses
Zeitraums durchlaufen L428 Zellen unter Kulturbedingungen eine Zellteilung.
Die Ergebnisse sind in Abbildung 4.30 dargestellt.
Anteil der Zellen [%]
120
100
80
60
40
20
0
direkt nach
Bestrahlung
BerH2-Au
76 mJ/cm²
MIB1-Au
76 mJ/cm²
BerH2-Au
0 mJ/cm²
24h nach
Bestrahlung
BerH2-Au
76 mJ/cm²
MIB1-Au
76 mJ/cm²
tot
lebendig
BerH2-Au
0 mJ/cm²
Abbildung 4.30: Anteil geschädigter L428 Zellen in Abhängigkeit von der Bestrahlung
nach Inkubation der Zellen mit BerH2-Goldkonjugaten bei 37◦C; direkt nach der
Bestrahlung und 24 h nach der Bestrahlung.
Die Schädigung der Zellen direkt nach der Bestrahlung verhält sich prinzipiell genau
wie in den vorangehend beschriebenen Ergebnissen: Die L428 Zellen, die mit
dem passenden Antikörper-Gold-Konjugat inkubiert wurden, sind die einzigen,