Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...

Material und Methoden 75
normierte Bestrahlung
1
0.8
0.6
0.4
0.2
B
[mJ/cm²]
0
-0.001
-1.5 -1 -0.5 0.5 1 1.5
x [mm]
a) b)
2
1.5
1
0.5
-0.0005
x[m]
0
0.0005
-0.001
0.001
Abbildung 3.15: Muster der scannenden Bestrahlung zur Untersuchung der aP-
Goldkonjugate. a) Überlappung der einzelnen Strahlprofile miteinander; Die Probentöpfchen
mit 2 mm Durchmesser sind eingezeichnet; b) Summe der Energien (Gesamtbestrahlung)
in einem Probentöpfchen mit 2 mm Durchmesser.
Je nach Schadensmechanismus wirkt sich die scannende Bestrahlung unterschiedlich
auf die Inaktivierung der Proteine aus. Bei einem stark von der Laserleistung
abhängigen Effekt wie dem thermischen Schaden kommt es zu einer geringeren
Inaktivierung als bei einem rein von der Bestrahlung abhängigen Schadensmechanismus
wie z.B. Einphotonen-Photochemie. Dieser geringer ausfallende Schaden
bewirkt ein Abflachen der Inaktiveirung in Abhängigkeit von der Bestrahlung.
Der Schaden lässt sich bei bekanntem Strahlprofil jedoch gut berechnen.
Eine scannende Bestrahlung ist damit bei limitierter Laserenergie eine gute Möglichkeit,
um große Probenvolumen zu untersuchen.
3.2.4 Bestrahlung der Mikroabsorber-Konjugate
Bestrahlung der Polystyren-Magnetit-Konjugate
Zur Bestrahlung der Polystyren-Magnetit-Konjugate mit alkalischer Phosphatase
(aP-PM-Konjugate) wurde der Rhodamin 6G Laser genutzt. Die Proben wurden
in transparenten Greiner 1536 Well Platten mit 4 µl Volumen und einer quadratischen
Grundfläche mit 1.5 mm Kantenlänge hergestellt. Die Konzentration der
Partikel wurde so eingestellt, dass der Boden der Töpfchen zu 3/4 bedeckt war.
0
-0.0005
0.0005
0.001
y[m]