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Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...

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118 Material <strong>und</strong> Methoden<br />

# Ereignisse<br />

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U 937 L 428<br />

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Eigenfluoreszenz<br />

PFA fixiert (2%)<br />

IgG-Kontrolle<br />

A 488<br />

CD30/ A 488<br />

Abbildung 3.44: CD30-Expression der Zelllinien L428 <strong>und</strong> U937. Dargestellt ist<br />

Berh2 (Anti-CD30) Bindung an die <strong>Zellen</strong> über die Fluoreszenz <strong>von</strong> einem Alexa-488<br />

markierten Sek<strong>und</strong>ärantikörper, der an BerH2 bindet.<br />

Aus den Fluoreszenzanfärbugen folgt, dass sich die Zelllinien U937 <strong>und</strong> L428 in<br />

der CD30 Expression zu >99% unterscheiden. Damit sind sowohl die <strong>Zellen</strong> als<br />

auch die genutzten Antikörper als Testsystem geeignet.<br />

In Versuchen zur <strong>Inaktivierung</strong> der <strong>Zellen</strong> mit dem Antikörper-Goldkonjugat<br />

BerH2-Au wurden <strong>Zellen</strong> in Glas-Lochplatten mit 4 µl Probenvolumen bestrahlt.<br />

Die Zellzahl wurde so gewählt, dass der Plattenboden <strong>durch</strong> eine Zellschicht bedeckt<br />

wurde. Dies führte zu einer Konzentration <strong>von</strong> 105 <strong>Zellen</strong>/µl. Der Totanteil

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