Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...
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Material <strong>und</strong> Methoden 87<br />
kommt es <strong>durch</strong> die Positionierung der Klimakammer gegenüber dem Deckel <strong>und</strong><br />
<strong>durch</strong> die Verwirbelung zu einem sehr schnellen Abfall der Luftfeuchte, der nicht<br />
nachreguliert werden kann. Die Verwirbelung wurde nach Erreichen der 100 %<br />
r. F. deswegen auf ein Minimum reduziert. Die Tröpfchenbildung um den Probentropfen<br />
auch bei einer langsamen Verdunstung der Probe scheint eine prinzipielle<br />
Limitierung der Probenlebensdauer <strong>durch</strong> Umverteilungsprozesse innerhalb der<br />
Probenkammer darzustellen. Vorstellbar ist, dass die Probentropfen zugunsten<br />
des Wasserreservoirs aufgr<strong>und</strong> der Erhöhung des Dampfdrucks <strong>durch</strong> die Oberflächenspannung<br />
verdunsten. Kleine Tröpfchen bilden sich dagegen kontinuierlich<br />
<strong>durch</strong> entropische Umverteilungsprozesse, die auf einen homogenen Wasserfilm in<br />
der gesamten Kammer hin zielen. Die notwendige Kondensation <strong>und</strong> die Oberflächenspannung<br />
führen jedoch nicht zur Bildung eines Films, sondern zur Bildung<br />
der kleinen Tröpfchen, die groß genug sind, dass sie nicht sofort zugunsten des<br />
Reservoirs verdunsten.<br />
Berücksichtigt werden muss außerdem, dass sich der Dampfdruck in den Proben<br />
<strong>durch</strong> z.B. <strong>durch</strong> gelöste Salze oder Proteine verändert. Salze setzen generell<br />
den Dampfdruck herab [1], so dass z. B. über einer 5 M KCl Lösung eine relative<br />
Feuchte <strong>von</strong> nur 70 % herrscht. Je nach Probengröße muss dies bei der Zusammensetzung<br />
des Flüssigkeitsreservoirs berücksichtigt werden.<br />
Probenträger<br />
Eine Bestrahlung der Proben kann nur <strong>durch</strong> den Probenträger erfolgen, da der<br />
Probentropfen eine starke Linsenwirkung hat, die bei Bestrahlung <strong>von</strong> oben zu<br />
einer ungleichmäßigen Bestrahlung führt. Der Krümmungsradius des Tropfens<br />
wird vom Probenträgermaterial <strong>und</strong> der Oberflächenspannung der Probenlösung<br />
bestimmt. Für eine homogene Bestrahlung der Proben <strong>durch</strong> den Probenträger<br />
muss der Kontaktwinkel der Probe kleiner als der Totalreflexionswinkel sein. Ansonsten<br />
kommt es <strong>durch</strong> Totalreflexion an der Grenzfläche Tropfen-Luft zu einer<br />
Intensitätsüberhöhung in der äußeren Tropfenschale. Dies ist in Abbildung 3.24<br />
dargestellt.
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