Inaktivierung von Proteinen und Zellen durch Laserbestrahlung von ...

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130 Ergebnisse Gold ausbildet. Nach Bestrahlung mit 69 mJ/cm2 oberhalb der Zerstörschwelle der Partikel (Abbildung 4.8) ist auffällig, dass selbst die Partikelfragmente noch teilweise mit Protein oder Proteinresten beschichtet sind. Um was für ein Protein es sich dabei handelt, kann aufgrund der Bilder nicht bestimmt werden. Da weder α-Chymotrypsin noch BSA bei den während der Bestrahlung genutzten Pufferbedingungen spontan an die intakten Goldpartikel binden, ist es möglich, dass es sich um gebundenes Chymotrypsin handelt. a b 15 nm Abbildung 4.8: Jeweils 6 typische elektronenmikroskopische Aufnahmen von mit 10000 Pulsen bestrahlten 15 nm Goldkonjugaten (35 ps-Pulse; 527 nm) a) 69 mJ/cm2 , und b) unbestrahlten Konjugaten. Die Proteinhülle um die Konjugate ist in den Aufnahmen auch nach Bestrahlung teilweise zu erkennen (Pfeil). 4.2 Sekundentemperatursprünge im Wasserbad 4.2.1 Denaturierungsrate von alkalischer Phosphatase Um Raten für die thermische Denaturierung von alkalische Phosphatase in den bei den Partikelexperimenten verwendeten Zeitbereich extrapolieren zu können, wurden Wasserbad-Temperatursprung-Experimente an gelöstem Protein durchgeführt, da die vorhandene Literatur keine zufriedenstellende Daten über die thermische Denaturierungskinetik im zugänglichen Bereich bis zu wenigen Sekunden lieferte. Der Aktivitätsverlust, gemessen nach dem Wasserbadtemperatursprung, wurde als Maß für die Denaturierung des Enzyms genutzt. Die Experimente wurden durchgeführt, indem die Proben für1s, 2s, 4s, 10s, 15s, 20s, 50s, 60s und 120 s jeweils bei den Wasserbadtemperaturen 60 ◦ C, 65 ◦ C, 70 ◦ C, 75 ◦ C und 80 ◦ C erhitzt wurden. Für jede Temperatur wurde über einen exponentiellen Fit
Ergebnisse 131 die Denaturierungsrate kD(T ) bestimmt. In Abb. 4.9 ist diese Rate logarithmisch über die inverse Temperatur in der Arrheniusdarstellung” aufgetragen. Die Feh- ” lerbalken der Ordinate geben den Standardfehler an. Dies gilt, falls nicht anders angegeben, für alle folgenden Diagramme für Grössen, die auf den Ordinaten aufgetragen sind (Restaktivitäten, Raten). Denaturierungsrate[s ] -1 1 0.1 0.01 0.00280 0.00285 0.00290 0.00295 0.00300 0.00305 T -1 [K -1 Abbildung 4.9: Arrheniusdarstellung der Denaturierungsraten von in DEA-Puffer gelöster Phosphatase (Wasserbad-Temperatursprung-Experimente mit einer Temperaturanstiegszeit von
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Aus der Medizinischen Laserzentrum
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Inhaltsverzeichnis 1 Einleitung 1 2
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4.4 Bestrahlung der Mikrometerkonju
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Kapitel 1 Einleitung Laser ermögli
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Einleitung 3 und Bestrahlungszeit i
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Einleitung 5 Schädigungszeit [s] 1
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Einleitung 7 Der experimentelle Ans
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Kapitel 2 Theorie 2.1 Struktur und
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Theorie 11 im grünen Spektralberei
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Theorie 13 den Zustand minimaler En
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Theorie 15 Wirkungsquantum. Setzt m
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Theorie 17 Entfaltung bei 100°C En
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Theorie 19 heiten auf, die für ein
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Theorie 21 wird besonders an dem Be
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Theorie 23 Es wurden die Enzyme alk
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Theorie 25 a) Abbildung 2.5: Strukt
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Theorie 27 p [bar] 1000 100 10 1 0.
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Theorie 29 Experimentell wurde er z
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Theorie 31 Diesem Druck steht die T
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Theorie 33 denkbaren Quellterm δ(r
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Theorie 35 T = 0. Die Kugel mit dem
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Theorie 37 Greenfkt. [K m²/J²] .
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Theorie 39 Glas mit Gold purpurrot
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Theorie 41 527 nm den komplexen Bre
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Theorie 43 Absorption [willk. Einh.
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Theorie 45 Streuprozesse [69] kühl
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Theorie 47 �T [K/(mJcm²)] 100 1
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Theorie 49 2.5.2 Magnetit-Mikroabso
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Theorie 51 in. Ein bekanntes Beispi
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Kapitel 3 Material und Methoden 3.1
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Material und Methoden 55 Fluoreszen
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Material und Methoden 57 Diodensign
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Material und Methoden 59 Farbstoff
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Material und Methoden 61 Schwankung
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Material und Methoden 63 Die Puls-z
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Material und Methoden 67 a) b) Inte
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Material und Methoden 69 3.2.2 Raum
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Material und Methoden 73 breite des
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Material und Methoden 77 Glas Laser
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Seite 91 und 92: Material und Methoden 85 500µm Abb
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Seite 95 und 96: Material und Methoden 89 Abbildung
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Seite 123 und 124: Material und Methoden 117 Als diese
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Seite 127 und 128: Kapitel 4 Ergebnisse 4.1 Absorber-F
Seite 129 und 130: Ergebnisse 123 0,6 µs 1,6 µs 2,0
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Seite 139 und 140: Ergebnisse 133 chymo-SM-Konjugate D
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Seite 145 und 146: Ergebnisse 139 der Pulsenergie wurd
Seite 151 und 152: Ergebnisse 145 Die Aktivität der K
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Seite 159 und 160: Ergebnisse 153 Zellmembran in keine
Seite 161 und 162: Ergebnisse 155 perimente wurden min
Seite 163 und 164: Ergebnisse 157 4.6.3 ZelluläreEffe
Seite 165 und 166: Ergebnisse 159 a) Abbildung 4.31: A
Seite 167 und 168: Ergebnisse 161 hängigkeit von der
Seite 169 und 170: Ergebnisse 163 Anteil lebender Zell
Seite 171 und 172: Ergebnisse 165 Diese Regionen stell
Seite 173 und 174: Kapitel 5 Modellierung der Schäden
Seite 175 und 176: Schadensmodellierung 169 Material Q
Seite 177 und 178: Schadensmodellierung 171 5.1.2 Temp
Seite 179 und 180: Schadensmodellierung 173 zu erwarte
Seite 181 und 182: Schadensmodellierung 175 T [K/(mJ/c
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Schadensmodellierung 181 in der ges
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Schadensmodellierung 183 5.2.2 Bere
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Kapitel 6 Diskussion 6.1 Thermische
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Diskussion 187 6.1.1 Einfluß der P
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Diskussion 191 Blasenbildungsschwel
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Diskussion 193 bis zum spinoidalen
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Diskussion 201 dazu wurde erst bei
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Diskussion 203 labilen Aminosäuren
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Diskussion 207 mamembran am reduzie
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Kapitel 7 Ausblick Zu den Schwerpun
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Ausblick 211 Inaktivierungskinetik
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Ausblick 213 d.h. in der Beschichtu
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Ausblick 215 nem Tag zu kultivieren
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Kapitel 8 Zusammenfassung In der La
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Zusammenfassung 219 Goldpartikel wi
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Literaturverzeichnis [1] P. Adkins.
Seite 229 und 230:
Literaturverzeichnis 223 [22] C. Bo
Seite 231 und 232:
Literaturverzeichnis 225 [43] K. Di
Seite 233 und 234:
Literaturverzeichnis 227 [67] Z. Gr
Seite 235 und 236:
Literaturverzeichnis 229 [91] P. Ka
Seite 237 und 238:
Literaturverzeichnis 231 [114] C. P
Seite 239 und 240:
Literaturverzeichnis 233 [136] B. N
Seite 241 und 242:
Literaturverzeichnis 235 [159] J. R
Seite 243 und 244:
Literaturverzeichnis 237 [181] SPSS
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Literaturverzeichnis 239 [206] P. Z
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Danksagung 241 Ich danke Herrn Prof
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