In - bei Duepublico - an der Universität Duisburg-Essen

Experimenteller Teil
25 °C und 37 °C gelagert. In regelmäßigen Abständen wurde die Größe der
Nanopartikel mittels DLS bestimmt.
Weitere Agglomerationsversuche wurden in RPMI (Roswell Park Memorial
Institute), einem Zellkulturmedium, sowohl in reiner Form als auch mit dem
Zusatz von bovinem Serumalbumin (Bovine serum albumin, BSA) oder fetalem
Kälberserum (Fetal calf serum, FCS) durchgeführt. Die PVP-stabilisierten
Silber-Nanopartikel wurden mit einer Konzentration von 0,05 g L -1 in RPMI mit
verschiedenen Mengen an FCS (1-10 %) bzw. BSA (0,001-10 %) dispergiert.
Die Größenverteilung dazu wurde parallel mit DLS nach 20 Minuten und nach
24 Stunden bestimmt.
3.4 Biologische Aktivität
Für die Untersuchung der biologischen Aktivität wurden mesenchymale
Stammzellen (Human mesenchymal stem cells, hMSC) unter Anwesenheit von
Silber-Nanopartikeln und Silberionen unterschiedlicher Konzentrationen bei
37 °C für bis zu sieben Tagen inkubiert. Die hMSCs wurden zuvor in RPMI
unter Zusatz von 10 % FCS und L-Glutamin (0,3 g L -1 ) bei 37 °C, hoher
Luftfeuchtigkeit und 5 % CO2 in einem Inkubator aufgezogen. Anschließend
wurden die adhärenten Zellen mit PBS gewaschen und durch die Zugabe von
0,2 mL cm -2 0,25% Trypsin/0.1% Ethylendiamintetraessigsäure aus den
Zellkulturflaschen gelöst. Die Nanopartikel wurden in einem
Konzentrationsbereich von 50 mg L -1 bis 0,5 mg L -1 zu den Zellen gegeben.
Bezogen auf die Silbermenge wurden auch Silberacetat-Lösungen in den
gleichen Konzentrationen angesetzt.
Zur Analyse der Zellviabilität wurden die Zellen mit den Partikeln bzw. Ionen
zusammen für sieben Tage inkubiert, mit RPMI gewaschen und anschließend
mit Calcein-Acetoxymethylester (Calcein-AM) unter Zellkulturbedingungen für
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