UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA
Documento_completo
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Discusión<br />
La ingesta de DRG en forma de un evento único o en forma diaria aumenta los niveles de<br />
c‐Fos en la amígdala, por lo que en el tercer capítulo de esta Tesis Doctoral, se evaluó si las<br />
neuronas CRF de la amígdala son las que participan del circuito neuronal que se activa por la<br />
ingesta de DRG en forma única o diaria. Para ello, inicialmente se realizó validación de un ratón<br />
transgénico CRF‐hrGFP y se demostró que es una herramienta útil en nuestras condiciones de<br />
trabajo, al mostrar que las neuronas CRF de la amígdala presentan un aumento significativo en<br />
los niveles de c‐Fos cuando los ratones se exponen a estrés por confrontación social,<br />
ayuno/realimentación o administración de LPS.<br />
Primero, se utilizó una combinación de estudios de histoquímica e imágenes de<br />
fluorescencia para validar la expresión de hrGFP en las neuronas CRF de la amígdala, hecho que<br />
efectivamente ocurrió ya que la mayoría de neuronas CRF expresó hrGFP. Sorpresivamente, se<br />
detectaron pocas neuronas verdes fluorescentes en el NPV, en donde se ha demostrado que las<br />
neuronas CRF se concentran formando parte del eje neuroendocrino hipotálamo hipófiso<br />
adrenal, el cual se activa en respuesta al estrés (Bale and Vale, 2004). Las razones de la limitada<br />
expresión de hrGFP en este núcleo se desconocen, aunque podrían incluir falla en la inserción<br />
del BAC completo, efectos no deseados de la eliminación del transgen de la secuencia<br />
codificante de CRF y/o a la falta de elementos críticos en el BAC, necesarios para la expresión<br />
genética en el NPV (Matthaei, 2007, Gama Sosa et al., 2010). A pesar de estas consideraciones,<br />
las cuales conciernen a todos los modelos de ratones transgénicos, el ratón CRF‐hrGFP aquí<br />
descripto es una herramienta útil para el estudio del rol de las neuronas CRF de la amígdala.<br />
La amígdala es una región cerebral compleja con una amplia red de conexiones inter e<br />
intra‐nucleares (Sah et al., 2003). Las neuronas CRF representan una importante población<br />
dentro de la amígdala (Potter et al., 1994, Boorse and Denver, 2006). Aunque existe cierta<br />
discrepancia acerca de la localización de las neuronas CRF en este núcleo, la mayoría de los<br />
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