UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

Materiales y Métodos
inyectados bilateralmente en la amígdala (coordinadas estereotáxicas, AP: ‐1,2 mm, L: ‐2,4 mm
y V: 4,0 mm) con colchicina (32 µg en 4 µl) 72 hs antes del sacrificio (n=3). De las imágenes
obtenidas, de los resultados de la IHQ, se cuantificó el número total de células fluorescentes
verdes, de células fluorescentes rojas y de las colocalizaciones entre ambas a través de toda la
amígdala.
4.3.2. Caracterización funcional de las neuronas CRF de la amígdala.
Diferentes grupos de ratones CRF‐hrGFP alojados en cajas individuales, se sometieron a
diferentes manipulaciones experimentales que se describen a continuación:
−
Tratamiento con lipopolisacárido bacteriano (LPS): Los ratones se inyectaron con LPS
(25 ug/ratón, ip, n=3) o salina (n=2) y perfundidos luego de 2 hs de la inyección
− ‐Estrés por confrontación social: Los ratones se introdujeron de a uno por vez, por 10
minutos en una caja con un macho C57BL/6J dominante y agresivo de mayor edad.
Seguido a esta exposición los ratones se devolvieron a sus cajas individuales y se
perfundieron 2 hs después (n=5). Ratones control se introdujeron por 10 minutos en
una caja limpia y luego se devolvieron a sus cajas individuales y se perfundieron 2 hs
después (n=2).
−
Experimento de ayuno y realimentación: Los ratones se ayunaron en sus cajas
individuales a las 9.00 am del día experimental. Después de 48 hs, se perfundió un grupo
de ratones (n=3) y a otro grupo se le dio acceso a DC por 2 hs al cabo de las cuales se
perfundieron (n=3). Se controló la ingesta de alimento
−
Ingesta de DRG durante una sola exposición: En la mañana del día experimental los
ratones se expusieron a un pellet de DRG (n=5) y 2 hs después se perfundieron. Se
controló la ingesta durante las 2 hs de exposición.
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