UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

More documents

Recommendations

Info

Materiales y Métodos los cerebros y se cortaron en secciones coronales. Las secciones de cerebro se utilizaron para realizar distintas IHQs. 4.2 ESTUDIO DE LOS CIRCUITOS NEURONALES INVOLUCRADOS Y DEL ROL DE GHRELINA EN EL CONTROL DE MÚLTIPLES EVENTOS DE INGESTA DE DRG Para realizar este experimento los ratones se separaron en 3 grupos experimentales: 1)DC ad‐lib, a estos ratones (n=14) se los expuso a un pellet de DC de 9.00 a 11.00 am durante los 4 días del experimento; las 22 hs restantes de cada día tuvieron acceso libre a DC, 2)DRG ad‐lib, a este grupo (n=8) se lo expuso de 9.00 a 11.00 am de cada día a un pellet de DRG mientras que las 22 hs restantes se le dio acceso ilimitado a DRG y 3) DRG diario, grupo con acceso diario y por tiempo limitado a DRG. A este grupo de ratones se lo expuso a un pellet de DRG de 9.00 a 11.00 am durante los 4 días experimentales y a su vez tuvo, acceso constante e ilimitado a DC durante todo el día. En todos los casos se controló la ingesta total en las 2 hs de exposición a DC o DRG. Los 2 primeros grupos se perfundieron a las 11 am del cuarto día. Mientras que los animales que tuvieron acceso diario a DRG se fueron perfundiendo a distintos tiempos: (i) Luego de las dos horas de exposición a DRG el primer día (n=10, DRG/ post día 1), (ii) A las 9.00 am del tercer día del experimento, antes del acceso al pellet de DRG (n=11/, DRG/pre día 4 ) y (iii) Luego de la exposición a DRG el último día del experimento (n= 28, DRG/post día 4). Para algunos ratones de los grupos DC ad‐lib y DRG/post día 4 (n=11 y 24, respectivamente) se controló la ingesta de DC entre las 11 am y las 9 am del día siguiente (22 hs de ingesta de DC). Luego de las perfusiones, se extrajeron los cerebros y se acondicionaron para realizar distintas tinciones. 4.2.1 Análisis de la actividad locomotora anticipatoria Los ratones se alojaron en cajas individuales blancas una semana antes del comienzo del experimento. Para documentar la actividad locomotora, éstas se colocaron en cajas de monitoreo aisladas acústicamente y ventiladas mecánicamente (55 x 35 x 90 cm), equipadas con 42
Materiales y Métodos una cámara con iluminación LED regulable, en la parte superior de la caja. A las cajas individuales se les removió temporalmente su tapa y se reemplazó con una pared vertical, de forma de asegurar el confinamiento de los ratones y facilitar la grabación de los videos. Se habituó a los ratones al ambiente de grabación poniéndolos durante 90 minutos sin acceso a agua y a comida por 2 días consecutivos antes del inicio del procedimiento experimental. Éste consistió en sesiones de 150 minutos durante 5 días consecutivos, durante los cuales los ratones se pusieron en la cámara de grabación por 30 minutos sin acceso a agua y a comida, luego se les dio acceso, todavía en la caja, a un pellet de DC o DRG, por 60 minutos transfiriéndose posteriormente, al cuarto de ratones del bioterio con acceso a agua. Luego se retiró el pellet de DRG y se restituyó la DC hasta el día siguiente. Como control positivo de actividad locomotora anticipatoria, un grupo de ratones (n=3) se mantuvo con consumo restringido de DC (70% del consumo diario) durante los días de habituación y experimentales. Los videos de los primero 30 minutos de la actividad documentada se analizaron con el software SwisTrack. 4.2.2 Bloqueo de la acción de orexina Así como se realizó el bloqueo de la vía de señalización de orexina en un evento único de ingesta de DRG, se usó el antagonista SB‐334867 sólo para evaluar sus efectos en el grupo expuesto por 4 días a un pellet de DRG. Para esto, se inyectó intraperitonealmente vehículo o SB‐334867 (n=10 y 8, respectivamente), en la misma dosis utilizada previamente (5µgr/gr peso corporal), 30 minutos antes de ofrecerles el pellet de DRG (8:30 am) durante los 4 días que duró el experimento. Se controló la ingesta de alimento durante las 2 hs de exposición al pellet. Luego los animales se perfundieron, se les extrajeron los cerebros y estos se acondicionaron para la realización de distintas IHQs. 43
Page 1 and 2: UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA FA
Page 3 and 4: Índice Abreviaturas……………
Page 5 and 6: 5
Page 7 and 8: Introducción específicas como el
Page 9 and 10: Introducción Dentro de cada aspect
Page 11 and 12: Introducción Las neuronas de los n
Page 13 and 14: Introducción varios núcleos, como
Page 15 and 16: Introducción que eventualmente lle
Page 17 and 18: Introducción datos sugieren que la
Page 19 and 20: Introducción ACe, áreas corticale
Page 21 and 22: Introducción La ghrelina es secret
Page 23 and 24: Introducción Como se mencionó ant
Page 25 and 26: Introducción muy frecuentes, es de
Page 27 and 28: Introducción Por otro lado, se ha
Page 29 and 30: Introducción 4. MODELOS EXPERIMENT
Page 31 and 32: Introducción Hietala et al., 1994,
Page 33 and 34: Objetivos OBJETIVO GENERAL El objet
Page 35 and 36: 35
Page 37 and 38: Materiales y Métodos la Comisión
Page 39 and 40: Materiales y Métodos − − Tioni
Page 41: Materiales y Métodos (Perello et a
Page 45 and 46: Materiales y Métodos inyectados bi
Page 47 and 48: Materiales y Métodos derecha para
Page 49 and 50: Materiales y Métodos 6.2.4 IHQ flu
Page 51 and 52: Materiales y Métodos 6.3 Análisis
Page 53 and 54: Materiales y Métodos corregidos po
Page 55 and 56: Materiales y Métodos Para comparar
Page 57 and 58: Resultados 1. ESTUDIO DE LOS CIRCUI
Page 59 and 60: Resultados 59
Page 63 and 64: Resultados En el AVT, también se o
Page 65 and 66: Resultados 1.3 Un único evento de
Page 67 and 68: Resultados el HLat fueron las que s
Page 69 and 70: Resultados 1.5 El bloqueo del recep
Page 71 and 72: Resultados Además de afectar la ca
Page 73 and 74: Resultados 1.6 Las neuronas product
Page 77 and 78: Resultados − Utilización de rato
Page 79 and 80: Resultados Con el objetivo de deter
Page 81 and 82: Resultados Por último, para determ
Page 83 and 84: Resultados 2. ESTUDIO DE LOS CIRCUI
Page 85 and 86: Resultados 2.2 La actividad locomot
Page 93 and 94:
Resultados 93
Page 95 and 96:
Resultados [caparazón medial: t(5)
Page 97 and 98:
Resultados que para los animales de
Page 99 and 100:
Resultados 2.9 La administración d
Page 101 and 102:
Resultados 101
Page 103 and 104:
Resultados 103
Page 105 and 106:
105
Page 107 and 108:
Discusión saciados, y que la expos
Page 109 and 110:
Discusión mRNA de neuropéptidos y
Page 111 and 112:
Discusión alimentación (Palmiter,
Page 113 and 114:
Discusión neuronas productoras de
Page 115 and 116:
Discusión 2004, Kelley et al., 200
Page 117 and 118:
Discusión orexina no afectó el es
Page 119 and 120:
Discusión ingirieron DRG en cuatro
Page 121 and 122:
Discusión utilizadas, como el tipo
Page 123 and 124:
Discusión Actualmente, existe evid
Page 125 and 126:
Discusión La ingesta de DRG en for
Page 127 and 128:
Discusión neuronas CRF de la amíg
Page 129 and 130:
Discusión el sistema ghrelina‐GH
Page 131 and 132:
Conclusiones En conclusión, los re
Page 133 and 134:
133
Page 135 and 136:
Bibliografía receptor‐mediated i
Page 137 and 138:
Bibliografía Bugnon C, Fellmann D,
Page 139 and 140:
Bibliografía Davis C, Levitan RD,
Page 141 and 142:
Bibliografía Gama Sosa MA, De Gasp
Page 143 and 144:
Bibliografía Hotta M, Ohwada R, Ak
Page 145 and 146:
Bibliografía Kojima S, Nakahara T,
Page 147 and 148:
Bibliografía Mason BL, Wang Q, Zig
Page 149 and 150:
Bibliografía Palmiter RD (2007) Is
Page 151 and 152:
Bibliografía Saper CB (1982) Conve
Page 153 and 154:
Bibliografía Swart I, Jahng JW, Ov
Page 155 and 156:
Bibliografía Zahm DS (2000) An int
show all

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?