UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

Materiales y Métodos
una cámara con iluminación LED regulable, en la parte superior de la caja. A las cajas individuales
se les removió temporalmente su tapa y se reemplazó con una pared vertical, de forma de
asegurar el confinamiento de los ratones y facilitar la grabación de los videos. Se habituó a los
ratones al ambiente de grabación poniéndolos durante 90 minutos sin acceso a agua y a comida
por 2 días consecutivos antes del inicio del procedimiento experimental. Éste consistió en
sesiones de 150 minutos durante 5 días consecutivos, durante los cuales los ratones se pusieron
en la cámara de grabación por 30 minutos sin acceso a agua y a comida, luego se les dio acceso,
todavía en la caja, a un pellet de DC o DRG, por 60 minutos transfiriéndose posteriormente, al
cuarto de ratones del bioterio con acceso a agua. Luego se retiró el pellet de DRG y se restituyó
la DC hasta el día siguiente. Como control positivo de actividad locomotora anticipatoria, un
grupo de ratones (n=3) se mantuvo con consumo restringido de DC (70% del consumo diario)
durante los días de habituación y experimentales. Los videos de los primero 30 minutos de la
actividad documentada se analizaron con el software SwisTrack.
4.2.2 Bloqueo de la acción de orexina
Así como se realizó el bloqueo de la vía de señalización de orexina en un evento único de
ingesta de DRG, se usó el antagonista SB‐334867 sólo para evaluar sus efectos en el grupo
expuesto por 4 días a un pellet de DRG. Para esto, se inyectó intraperitonealmente vehículo o
SB‐334867 (n=10 y 8, respectivamente), en la misma dosis utilizada previamente (5µgr/gr peso
corporal), 30 minutos antes de ofrecerles el pellet de DRG (8:30 am) durante los 4 días que duró
el experimento. Se controló la ingesta de alimento durante las 2 hs de exposición al pellet. Luego
los animales se perfundieron, se les extrajeron los cerebros y estos se acondicionaron para la
realización de distintas IHQs.
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