UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PLATA

Materiales y Métodos
a través de toda la amígdala. La estimación del total de células inmunoreactivas para hrGFP en
la amígdala se cuantificó por el precipitado marrón en una de las 4 series de secciones coronales
a través de todo el núcleo. Luego estos números se sumaron y se multiplicaron por 4. Los datos
se corrigieron por el conteo doble mediante el método de Abercrombie.
6.4 Obtención de imágenes
Las imágenes fluorescentes y de campo claro se adquirieron con un microscopio Nikon
Eclipse 50i y una cámara digital DS‐Ri1 Nikon. Se utilizaron para la edición, ajuste de brillo y
contrastede las imágenes los programas Adobe Photoshop CS4 y Corel Draw 3. Para la
cuantificación de la DO se utilizó el programa Image J.
7. ANALISIS ESTADÍSTICO
El análisis se realizó con los programas GraphPad Prism 5.0 e IBM SPSS statistics 17.
Los datos se expresaron como la media ± SEM.
No se encontraron diferencias significativas entre los dos grupos de ratones WT (aquellos
provenientes de cruzas entre ratones WT y los hermanos WT de los ratones deficientes de
GHSR1a provenientes de cruzas de animales heterocigotas) en ninguna de las mediciones
realizadas, por lo que fueron agrupados en el análisis.
Para el análisis de más de tres grupos experimentales se utilizó ANOVA de una vía, seguido
por el test de Newman‐Keuls cuando las varianzas eran homogéneas; o en caso contrario, por el
test de Games‐Howell. El análisis de igualdad de varianzas se realizó mediante los test de Bartlett
o Levene.
Para comparar los datos provenientes del tratamiento con el antagonista de Ox1 vs los
tratados con vehículo en el protocolo de múltiples eventos de ingesta de DRG se utilizó un t‐
Test, con la corrección de Welch cuando los datos no presentaban varianzas iguales.
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