UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID FACULTAD DE ...

3. DISEÑO DE LA íNVESTIGACIÓN: MATERIAL Y MÉTODO
Estudio comparativo de la supervivencia en situación de isquémica - repeifusión
mesentérica, con y sin infusión de SOD
• Serie VI (SOD-l). Formada por 10 animales a los que les fue practicada una
laparotomía media y provocada una isquemia en la región mesentérica mediante el
clampaje durante 60 minutos de la AMC, seguida de otros 60 minutos de
repermeabilización, Inmediatamente antes de la retirada del clamp para permitir la
reperfusión, se administró una primera dosis de 200 U&g de SOD disuelta en
solución salina fisiológica (SS) en la proporción de 600 U/mI, en bolo intravenoso
(IV), seguida de una segunda inyección IV de igual dosis (200 U/kg), administrada
con un microinyector, durante los primeros diez minutos tras retirar el clamp.
• Serie VII (SOD-2). Formada por 10 animales a los que les fue practicada una
laparotomía media y sometidos a 60 minutos de isquemia e igual tiempo de
reperfusión. Justo antes de retirar el clamp que producía la isquemia y durante los
diez minutos inmediatos porteriores, se administraron respectivamente dos dosis de
0,33 ml/kg de solución salina fisiológica, la primera en bolo IV y la segunda
aplicada con microinyector regulado a lO minutos.
Estudio de la peroxidación lipidica en segmentos intestinales de animales sometidos a
isquemia-repermeabilización con y sin tratamiento con superóxido dismutasa (test del
TRA)
• Serie VIII (TBA-C). Operación simulada, formada por 5 animales que fueron
anestesiados durante 60 minutos, a los que se practicó una laparotomía sin provocar
isquemia, se les tomó una muestra de intestino de 5 cm de la porción media de
yeyuno, según la técnica descrita en 3.2.3 (Técnica quirúrgica; Extracción
intraquirúrgíca de segmentos intestinales), y finalmente fueron eutanasiados
mtraoperatoriamente.
• Serie IX (TEA-SOD). Serie isquémica, formada por 15 animales a los que se les
practicó una laparotomía media y provocó una isquemia en la región mesentérica
por clampaje de la AMC durante 60 minutos, seguida de otros 60 minutos de
repermeabilización. Inmediatamente antes de la retirada del clamp para permitir la
reperfúsión, se administró SOD antes y después de la reperfusión, con las mismas
dosis y método que el reseñado en la serie VI. Al final de los 60 minutos de
reperfusión, se les tomó una muestra de 5 cm de la porción media de yeyuno, con la
técnica descrita en 3.2.3 y finalmente fueron eutanasiados intraoperatoriamente.
• Serie X (TEA-SS>. Formada por 15 animales sometidos a isquemia en las mismas
condiciones y con el mismo método que la serie IX (60 mm 1 + 60 mm R), excepto
que se substituyó la solución de SOD en SS por únicamente SS, en volumen
equivalente.
Las muestras tisulares de estas tres series VIII, IX y X, se obtuvieron para
determinar, por medio del test del IBA, los valores de MDA, estableciendo los niveles
de peroxidación lipídica basales, con tratamiento con SOD + SS y únicamente con SS
respectivamente
El resumen de la distribución de animales en series experimentales se muestra en la
siguiente tabla:
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