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UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID FACULTAD DE ...

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3. DISEÑO <strong>DE</strong> LA INVESTIGACIÓN: MATERIAL Y MÉTODO<br />

Extracción de los órganos<br />

Se abrieron las cavidades torácica y abdominal, practicando un cone a nivel de<br />

la laringe supraglótica y mediante disección roma (digital) del paquete visceral toracoabdominal,<br />

se desinsertaba el diafragma. A continuación se seccionaba el recto, previa<br />

ligadura doble del mismo, extrayendo todo el paquete visceral junto. Posteriormente se<br />

extendía el intestino y se separaban las distintas vísceras de la cavidad abdominal. Así<br />

mismo se liberaban las vísceras retroperitoneales, lavando todo el conjunto con solución<br />

salina fisiológica.<br />

Sistemática de la disección<br />

La tráquea y pulmones se separaban del esófago, timo y corazón. Para separar el<br />

esófago, se seccionaba la unión con la tráquea, traccionando progresivamente. Con las<br />

tijeras de Metzenbaum se abría longitudinalmente la tráquea, seccionando el paquete<br />

vascularpulmonar y bronquial de cada pulmón, para separarlos del timo y corazon.<br />

El timo y corazón se separaban mediante disección con bisturí.<br />

El Hígado y vesícula se liberaban, primero el lóbulo hepático caudal adyacente a<br />

estómago y después separando todo el hígado mediante un corte a nivel del hilio.<br />

El esófago se seccionaba a nivel del cardias, para aislarlo del estómago. El<br />

estómago se cortaba a nivel del píloro y se abría siguiendo la curvatura mayor para<br />

extraer el contendido digestivo y proceder al lavado.<br />

Las porciones del intestino delgado se aislaban y abrían longitudinalmente.<br />

Dichos segmentos se lavaban con suero fisiológico antes de ser introducidos en formol.<br />

El apéndice cecal, el ciego el colon y el recto se aislaban y se abrían<br />

longitudinalmente.<br />

Los riñones se liberaban eliminando la grasa perirrenal y cortando el pedículo<br />

vascular, obteniendo la víscera con la cápsula propia del órgano.<br />

El bazo se obtuvo seccionando los vasos del hilio quedando de esta forma<br />

liberado.<br />

El páncreas se aisló de su lecho duodeno-peritoneal por disección de sus limites.<br />

El aparato genital se liberó en las hembras por transección del mesosalpinx,<br />

liberando los cuernos uterinos y seccionando la vagina; en los machos se liberaron los<br />

testículos seccionando la uretra y los conductos deferentes en su porción media.<br />

Toma de muestras<br />

Se tomaron porciones de hígado, riñones, pulmones, corazón, AMC e intestino:<br />

2 cm de yeyuno, 2 cm íleon y 2 cm colon proximal. Los segmentos intestinales abiertos<br />

longitudinalmente, se enrollaron en espiral sobre si mismos, atravesándolos<br />

transversalmente con un alfiler con objeto de facilitar la posterior sección con el<br />

microtomo y poder observar en el estudio microscómico varias áreas simultaneamente.<br />

Las porciones de órganos se introdujeron en frascos de toma de muestras los<br />

cuales inmediatamente se rellenaron con aldehido fórmico al 10% para su correcta<br />

conservación, se rotularon con medios indelebles con el número de la serie, el número<br />

del grupo y el número del animal y finalmente se remitieron, debidamente etiquetados,<br />

al laboratorio de anatomía patológica para su estudio.<br />

3.2.9 Metodología histológica<br />

Para el estudio de las piezas de necropsia se siguieron los siguientes pasos:<br />

Preparación y tallado de piezas<br />

‘76

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