UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID FACULTAD DE ...

3. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN: MATERIAL Y MÉTODO
• Inclusión en parafina.
• Realización de cortes histológicos con un espesor de 3 micras mediante
microtomo rotatorio.
• Desparafinación y mantenimiento en estufa a 1000 C. durante 30 minutos.
Posteriormente y previa tinción con diversas técnicas: hematoxilina-eosina
Giemsa, P.A.S. (para aldehidos de Schiff) y tricrómica de Masson, estos cortes fueron
estudiados mediante microscopia óptica.
La gravedad de las lesiones intestinales se valoró con arreglo al método de Chiu
modificado, clasificando las lesiones en los siguientes grados:
• Grado O. Mucosa intestinal normal.
• Grado 1. Desarrollo del espacio subepitelial de Gruenhagen
• Grado 2. Pérdida parcial del epitelio de revestimiento vellositario superficial,
con vellosidades denudadas.
Grado 3. Pérdida total del epitelio vellositario y necrosis intensa del epitelio
glandular de la mucosa.
• Grado 4. La necrosis se hace evidente en las capas musculares y se pierde la
mucosa en su totalidad.
3.2.10 Metodología estadística
El presente trabajo pretende confirmar las hipótesis alternativas, evidenciando
relaciones causales entre variables independientes y dependientes, empleando para
cohseguirlo varios tipos de diseños de investigación:
• Un estudio básico de supervivencia apoyado en una investigación experimental
en el que se registran datos para un periodo de tiempo (11 semanas) y además se
incorpora el momento en que se produce el evento muerte (estudio longitudinal)
en animales sometidos a diferentes tiempos de isquemia mesentérica de la AMC.
• Un ensayo de modificación de la supervivencia (longitudinal) en animales
sometidos a un tiempo determinado (tiempo de mortalidad 50) de isquemia de
la AMC y tratados con un antioxidante (SOD) comparado con otro grupo sin
tratamiento.
• Un ensayo clínico, para determinar la peroxidación lipídica en segmentos
intestinales normales, isquémicos y tratados con SOD, calculando en cada grupo
las concentraciones de MDA; en este estudio, los animales son sacrificados en
un momento dado (estudio transversal).
El proceso estadístico difiere según el tipo de estudio, detallándose en los siguientes
apanados:
1) Estudios de supervivencia
• Variables:
- Independiente: diferentes tiempos de isquemia a que son sometidas las series
- Dependiente: mortalidad
• Matriz de datos: Los resultados de la supervivencia se exponen tabulados. El
estudio estadístico llevado a cabo fue:
- Valoración de la supervivencia (proporción acumulada de supervivencia),
por el método descrito por Kaplan y Meier en 1958216, agrupando el tiempo
de participación de cada sujeto en intervalos de tiempo predeterminados y
calculando las probabilidades de supervivencia mediante la estimación de las
probabilidades condicionadas de supervivencia correspondientes a cada uno
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