Enzkin - Elm-Asse-Kultur

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Metabolismus
erzeugt eine starke Extinktionsbande bei 340 nm.
2.4 Prinzip des Aktivitätstests für NAD + -abhängige Dehydrogenasen: der
optische Test
Die bei der Reduktion des Nicotinsäureamidringes auftretende Extinktion bei 340 nm
dient als Messparameter zur Verfolgung von Dehydrogenasereaktionen. Die
Zunahme der Extinktion je Zeiteinheit ist damit ein direktes Maß der
Reaktionsgeschwindigkeit; bei hoher Substratkonzentration ( Enzymsättigung) ist sie
der Enzymkonzentration proportional. Dieser "optische Test" ist für die (klinische)
Laboratoriumspraxis von großer Bedeutung:
Abb. 2.3: UV-Spektrum der
Pyridinnuclotide:
die reduzierte Form weist ein
Maximum bei 340 nm auf
Abb. 2.4: "optischer Test" einer
NAD + -abhängigen Dehydrogenase
die Extinktionsänderung ist gegen die
Zeit aufgetragen. Mit mehr Enzym
verläuft die Reaktion schneller
Da NADH,H + nicht nur eine Extinktionsbande (E 340 ) aufweist, sondern durch
Bestrahlen mit Licht einer Wellenlänge von 340 nm auch zur Fluoreszenz (F 495 )
angeregt werden kann, steht ein weiteres, um viele Größenordnungen
empfindlicheres Messprinzip zur Verfügung.