Enzkin - Elm-Asse-Kultur

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Daten
3 CHEMISCHE UND PHYSIKALISCHE DATEN
3.1 für NAD + und NADH,H + (molare Extinktionskoeffizienten)
NAD + : ε 259 = 17800 (cm 2 /mmol) 1
NADH,H + : ε 340 = 6300 (cm 2 /mmol)
Ist ε für eine Substanz bekannt, so kann aus einer gemessenen E die Konzentration
berechnet werden:
c =
E /ε
Es läßt sich weiter ableiten, dass die Menge an NADH,H + , die in einer Reaktion
oxidiert oder die Menge von NAD + , die in einer Reaktion reduziert wird, aus der
gemessenen Änderung der Extinktion, ∆E, berechnet werden kann.
Beispiel:
∆E 340 = 1 = 0.16 µmol NADH/ml
Unbelehrbare Personen überzeugen sich von diesem Sachverhalt mit Hilfe des
Programms "Activity"
3.2 Phosphofructokinase (ATP-Fructose-6-Phosphat-Phosphotransferase,
Enzym des Schrittes 3, EC 2.7.1.11)
Eine ausführlichere Würdigung regulatorischer Eigenschaften der PFK
(insbesondere des Glucagoneffektes) folgt in Kapitel 7 des Umdruckes.
Prinzip: PFK ist eine oligomere Phosphotransferase, gleichzeitig das zentrale
regulatorische Enzym der Glycolyse. PFK wird durch die Gegenspieler
Insulin/Glucagon aktiviert bzw. gehemmt. Insulin induziert das Enzym nicht nur,
sondern aktiviert es auch unter Vermittlung des cytosolischen pH-Wertes.
PFK zeigt eines der ausgeprägtesten für Enzyme beschriebenen pH-Profile, indem ihre Aktivität
innerhalb 0.1 pH-Einheiten von nahe Null auf 100% angehoben wird. Dieser Effekt kann nicht auf der
Titration eines einzelnen Aminosäurerestes zurückgehen (lineares Intervall entsprechend einer pH-
Einheit) sondern entsteht durch eine Überlagerung verschiedener pH-Effekte, so z.B. der
säureinduzierten Dissoziation in inaktive Untereinheiten.
1 Die Einheit des Extinktionskoeffizienten folgt aus dem Lambert-Beerschen Gesetz, ε = E/c × d.
Im deutschen Sprachraum wird manchmal noch die Konzentration in mol/cm 3 anzugeben. Daraus
resultiert die Dimension (1/((mol/cm 3 × cm) bzw. cm 2 /mol. Im internationalen Schrifttum (und allen
vorliegenden Ausführungen) wird die Konzentration in mol/l ausgedrückt, woraus als Dimension
1/((mol/l) × cm), 1/((mmol/cm 3 ) × cm) bzw. cm 2 /mmol folgen.