Enzkin - Elm-Asse-Kultur

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Inhalt.
5.3 Freie Standardenthalpie der GAPDH- und GDH-Reaktionen 38
5.3.0 Berechnung von Gleichgewichtskonstanten aus
Literaturwerten für ∆G o (B0) 38
5.3.1 Gleichgewichtskonstante und ∆G o -Wert der
GAPDH-Reaktion (Gleichgewichtseinstellung) (B1) 39
5.3.2 Gleichgewichtskonstante und ∆G o -Wert der
GAPDH-Reaktion (kinetischer Ansatz) (B2) 40
5.3.3 Gleichgewichtskonstante und ∆G o -Wert der
GDH-Reaktion (B3) 41
6. BESTIMMUNG VON METABOLITENKONZENTRATIONEN IN
BIOLOGISCHEN FLÜSSIGKEITEN
• NACH DER ENDPUNKTMETHODE: Versuche C 43
6.1 Das Messprinzip
6.2 Versuche am Kaninchenmuskel-Extrakt (C1) 43
6.2.1 Nachweis von ATP (C1.1) 43
6.2.2 Nachweis von 3-PG (C1.2) 44
6.2.3 Nachweis von DAP und benachbarten Metaboliten (C1.3) 44
6.2.4 Lage des NAD + /NADH,H + -Gleichgewichts im Muskel (C1.4) 44
6.3 Versuche an diversen proteinfreien Extrakten (C2) 46
6.3.1 Herstellung eines Extraktes aus Kaninchenherz (C2.2)
6.3.2 Entproteinieren des Skelettmuskelextraktes
durch Pepsin (C2.2) 46
6.3.3 Metabolitengemisch unbekannter Herkunft (C2.3)
6.3.4 Energiereiche Phosphate: ATP (C2.4.1) 47
6.3.5 ” “ Creatin-Phosphat (CP) (C2.4.2) 48
6..6 Energiemangel-Metabolite: ADP (C2.4.3) 49
" “ AMP (C2.4.4) 49
6.3.8 " “ Creatin (C2.4.5) 49
• NACH DER KINETISCHEN METHODE:
6.4.1 Das Messprinzip 50
6.4.2 Prinzip der Biolumineszenz 50
6.5 Biolumineszenzmessungen mit dem Luminometer 51
6.5.1 Luciferin/Luciferaserpräparat (C3.0) 51
6.5.2 Eichreihe für ATP (C3.1) 51
6.5.3 Energiereiche Phosphate: ATP und Creatin-P (CP) (C3.2) 52
7. REGULATORISCHE ENZYME
7.1 Phosphofructokinase: ein Schlüsselenzym bei der Versuche D 54
Regulation des Metabolitenflusses im Glycolyseweg 54
7.2 Vorstellungen zum Wirkungsmechanismus von
Effektoren bei oligomeren Enzymen: Beispiel der
Phosphofructokinase der Glycolyse 55
7.3 Zur Regulation der Phosphofructokinase (D1) 56
7.4 Phosphofructokinase, ein kooperatives Enzym (??) (D2) 59
7.5 Pyruvatkinase, ein kooperatives Enzym (?) (D3) 59
8. BESTIMMUNG VON K M UND K I WERTEN
8.1 Sättigungsphänomene: der ES-Komplex Versuche E 62
8.2 Katalytische Effizienz: das k cat /K m -Kriterium 63
8.2.1 Abschätzung der katalytischen Effizienz 64