Enzkin - Elm-Asse-Kultur

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Daten
Der K + Effekt ist strikt mit dem des F-1.6BP gekoppelt, das als ´feedforward́-Aktivator
fungiert und Kooperativität für PEP (aber nicht für ADP) hervorruft.Dieser
Mechanismus gilt als ein wichtiger Schalter für den Übergang der Gluconeogenese
zur Glycolyse.
Das Enzym wird auch in vivo durch ATP inhibiert. Dessen Kompetition mit
ADP und PEP läßt einen gemeinsamen Phosphatbindungsplatz vermuten. Phe
wurde als nichtkompetitiver Inhibitor beschrieben und zwar mit Hill-Koeffizienten die
zwischen pH7 und 8 von 0.85 auf 2 steigen PK war übrigens das erste Protein, für
welches ligandeninduzierte Konformationsänderungen durch Trp-Differenzspektren
nachgewiesen wurden.
3.5 Lactatdehydrogenase, Enzym des Schrittes 12
Lexikon Biochemie, 2. Auflage 1982, Verlag Chemie
Prinzip: LDH, Benannt nach der thermodynamisch ungünstigen Rückreaktion des
Substrates Milchsäure (Lactat) zu Pyruvat. Absolut spezifisch für L(+) Lactat. Die
höchsten LDH-Aktivitäten weisen Herzmuskel und Leber auf. Da das Enzym ein
Tetramer aus vier 35k Untereinheiten ist, treten organspezifisch fünf isomere
Isoenzyme aus der M- bzw. der H-Kette auf (Kapitel 8.10). Die Isoenzyme lassen
sich aufgrund verschiedener pH I -Werte elektrophoretisch trennen, wobei das H 4
Enzym am stärksten negativ geladen ist. Für das 'tuning' der Glycolyse und des
Citratcyclus ist die unterschiedliche Regulation durch Pyruvat und NAD + wichtig, zum
analytischen Nachweis dient vereinfachend die unterschiedliche Hemmbarkeit durch
Pyruvat-Analoge (Kapitel 8.10). Die H 4 und H 3 M-Formen sind ferner extrem
thermolabil (Inaktivierung durch 5 Min bei 65 o ).
LDH dient zur Diagnose des Herzinfarktes und der Hepatitis, da bei diesen
Krankheitsbildern der Serumgehalt des entsprechenden Isoenzyms stark erhöht ist.
Gereinigte LDH dient im gekoppelten optischen Test zur Messung anderer
Enzymaktivitäten wie PK, Enolase, Transaminasen, sowie zur enzymatischen
Bestimmung zahlreicher Metabolite wie ADP, ATP, L(+)-Lactat und Pyruvat.
Enzykinetische Daten:
Enzym Rind-H 4 Hühner-H 4 Rind-M 4 Hühner-M 4
K m (Pyruvat) 1.4E-4M 8.9E-5M 1E-3M 3.2E-3M
Turnover No. 49400 45500 80200 93400