Freie Vorträge und Poster - Jahrestagung DDG 2012

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S38 46. Jahrestagung der Deutschen Diabetes-Gesellschaft | 1. – 4. Juni 2011, Leipzig P96 Einfluss eines intermittierenden Hypoxietrainings auf die MCT in der Skelettmuskulatur und den Erythrozyten bei männlichen nicht-insulinpflichtigen Typ 2 Diabetikern Lenzen E 1 , Opitz D 1 , Kreutz T 1 , Brinkmann C 1 , Frese S 1 , Wahl P 1 , Schiffer T 2 ,GrafC 3 , Brixius K 1 , Bloch W 1 1 Deutsche Sporthochschule Köln, Institut für Kreislaufforschung und Sportmedizin – Abteilung für molekulare und zelluläre Sportmedizin, Köln, Germany; 2 Deutsche Sporthochschule Köln, Institut für Motorik und Bewegungstechnik, Köln, Germany; 3 Deutsche Sporthochschule Köln, Institut für Bewegungs- und Neurowissenschaften, Abteilung für Bewegungs- und Gesundheitsförderung, Köln, Germany Fragestellung: Die Monocarboxylattransporter 1 und 4 (MCT1 und MCT4) sind insbesondere unter Belastung essentiell für den Transport von Laktat und die pH-Wert Regulation. Untersuchungen zeigen, dass die MCT-Proteinexpression bei Typ-2-Diabetikern verändert ist. Da es Hinweise gibt, dass Höhenaufenthalte zu einer verstärkten MCT- Proteinexpression führen, wurde in der vorliegenden Studie der Einfluss eines normobaren intermittierenden Hypoxietrainings auf die Proteinexpression des MCT1 und MCT4 in den Skelettmuskelfasern und des MCT1 in den Erythrozyten bei nicht-insulinpflichtigen Typ-2 Diabetikern untersucht. Methodik: Die Studienteilnehmer (n = 12, Alter: 60,6 € 8,2 Jahre, BMI: 31,1 € 4,2) nahmen an einem sechswöchigen moderaten Bewegungsprogramm (4 x 90 min/Woche) unter normobarer Hypoxie bei einem FiO2 von 0,15 bis 0,13 teil. Vor und nach der sechswöchigen Trainingsintervention wurde bei den Patienten eine EKGüberwachte Belastungsspiroergometrie (WHO-Schema) durchgeführt. Die venösen Blutproben für die immunhistochemische Auswertung des MCT1 in den Erythrozyten wurden vor, sowie eine und fünf Minuten nach der Belastung entnommen. Für die immunhistochemische Analyse der MCT1- und MCT4- Dichte im Muskel wurde bei den Diabetespatienten zu jeder der zwei genannten Untersuchungen eine Muskelbiopsie am M. vastus lateralis durchgeführt. Im Rahmen der Auswertung wurde zwischen der membranösen und cytoplasmatischen MCT- Dichte differenziert. Desweitern wurde eine immunhistochemische Muskelfasertypisierung durchgeführt. Ergebnisse: Das intermittierende Hypoxieintervaltraining bewirkte bei den Probanden eine signifikante Zunahme der maximalen Wattleistung und von VO2peak beim WHO-Stufentest. Die Dichten der Laktattransporter MCT1 und MCT4 in der Muskulatur und MCT1 in den Erythrozyten blieben unverändert. Die Muskelfasertypisierung zeigte nach der Trainingsintervention keine signifikanten ¾nderungen. Schlussfolgerungen: Die Bewegungsintervention unter normobarer Hypoxie hat nicht zu einer Erhöhung der Laktattransporterkapazität in der Muskulatur und in den Erythrozyten der Typ-2-Dibetiker geführt. Die gemessenen Leistungsverbesserungen sind auf eine neuromuskluläre Ökonomisierung und auf die Verbesserung der intrinsischen Motivation der Diabetespatienten zurückzuführen. P97 Auswirkungen eines Nährstoffüberangebotes und des sekundären Pflanzenstoffes Resveratrol auf die Enzymaktivität des NAD-Schlüsselenzyms NAMPT Schuster S 1 , Petzold- Quinque S 1 , Garten A 1 , Penke M 1 , Gebhardt R 2 , Barnikol-Oettler A 1 , Laue S 1 , Kiess W 1 1 Universitätsklinikum für Kinder und Jugendliche Leipzig, Pädiatrisches Forschungszentrum, Leipzig, Germany; 2 Institut für Biochemie, Medizinische Fakultät, Universität Leipzig, Leipzig, Germany Fragestellung: Nikotinamidphosphoribosyltransferase (NAMPT) ist das geschwindigkeitsbestimmende Enzym der humanen NAD- Biosynthese. Durch die Aufrechterhaltung des intrazellulären NAD- Pools reguliert es die Aktivität NAD-abhängiger Enzyme, wie z.B. der Sirtuine. Damit übt die NAMPT-vermittelte Sirtuin1- Aktivierung einen wichtigen Einfluss auf den Zellstoffwechsel sowie auf immunmodulierende Zellantworten aus. Ziel war, 1.) die Etablierung eines radioaktiven NAMPT- Enzymaktivitätsassays, der es ermöglicht, die Auswirkungen eines Nährstoffüberangebotes sowie den Einfluss des Polyphenols Resveratrol auf die NAMPT- Aktivität zu untersuchen und 2.) die Veränderungen im intrazellulären NAD- Spiegel zu analysieren. Methodik: HepG2- Zellen, primäre humane und Rattenhepatozyten wurden kultiviert. Die NAMPTund SIRT1- Expression wurde mittels Western blot und ELISA bestimmt. Mithilfe eines radioaktiven Filterassays konnte die NAMPT- Enzymakti- vität quantifiziert werden. Zytotoxische Effekte wurden mittels LDH- Assay detektiert. Die real-time PCR wurde genutzt, um die NAMPT mRNA Spiegel zu messen. Die intrazelluläre NAD- Konzentration wurde mithilfe eines fluorimetrischen NAD- Assays bestimmt. Ergebnisse: Es wurde ein radioaktives NAMPT- Enzymaktivitätsassay mit optimalen Parametern (pH-Wert, Proteinmenge, Inkubationszeit) etabliert. Resveratrol führte zu einer Erhöhung der NAMPT- Aktivität in HepG2- Zellen (+50,2 € 2,6%; 10 mM), primären Rattenhepatozyten (+262,1 € 9,5%, 50 mM) und humanen Hepatozyten (+112,0 € 13%; 100 mM), sowie zu einem Anstieg der NAD- Spiegel in HepG2- Zellen um 61,8 € 23,7%. Hohe Dosen von Resveratrol (100 mM) hingegen ließen die NAMPT- Aktivität signifikant um 47,7 € 3,2% abfallen und führten zu einer stark verringerten Zellproliferation (-60,5 € 1,7%) in HepG2- Zellen. Hohe Glukosekonzentrationen (30mM) verringerten die NAMPT- Aktivität um 51,3 € 9,0%. Eine Kombination von Glukose und Insulin steigerte jedoch die NAMPT- Enzymaktivität um 101,6 € 25,3%. Palmitat (0,5mM) induzierte zytotoxische Effekte, eine erhöhte NAMPT- Freisetzung (+201,1 € 12,9%) und mRNA Expression (1,2- fach) in HepG2- Zellen. Oleat, Palmitat und eine Oleat/Palmitat- Kombination hatten keinen Einfluss auf die NAMPT- Proteinexpression und Enzymaktivität. Schlussfolgerung: Der sekundäre Pflanzenstoff Resveratrol ist ein potentieller Aktivator der NAMPT- Enzymaktivität. Die positiven Effekte von Resveratrol scheinen durch eine Hochregulierung der intrazellulären NAD- Spiegel und einer damit verbundenen erhöhten NAMPT- Aktivität vermittelt zu werden. Hohe Glukosekonzentrationen senken die NAMPT- Aktivität. Die durch Insulin induzierte Verstoffwechselung der Glukose scheint notwendig zu sein, um die NAMPT- Aktivität aufrecht zuerhalten. Palmitat induziert Zelltod, eine erhöhte Freisetzung von NAMPT aus den Hepatozyten und eine gesteigerte NAMPT mRNA Expression, welche möglicherweise die intrazellulären NAMPT und NAD- Spiegel, zum Schutz der Zelle, aufrechterhalten soll. P98 Evaluation of serum triglyceride levels as a marker of long-term patient compliance in diabetes mellitus type Stylianou A 1 , Lavranos G 1 , Hatziyianni A 1 , Georgiou P 1 , Olymbios G 1 1 Diabetology Clinic, Larnaca General Hospital, Innere Medizin, Larnaca, Cyprus Introduction: Hypertrigliceridemia has been described as a very common co-morbidity in diabetes mellitus II patients, associated with insulin resistance and lipotoxicity. Although the exact pathophysiological association remains controversial, it is an established fat that increased fat circulation and localized accumulation, especially visceral, predisposes to faster disease progression and onset of macro- or micro-vascular complication. This clnical study aims to evaluate the presence of any correlation between long-term glycemic and lipidemic control in diabetic mellitus type II patients, based on the moderate use of statin treatment. Materials and methods: The study population consists of 138 patients with diabetes mellitus type II, of which 85 males (mean age 61.1 € 4 years) and 53 females (mean age 61.5 € 5 years). All patients were tested bimonthly in the Diabetology Outpatient Department of our Clinic throughout 2010. For both sexes, mean years post diagnosis were 7.5 € 5. Patients were grouped according to the presence or absence of known hypertrigliceridemia and statin use and HbA1c% and serum lipids were measured every 3 months. Results were analyzed via ANOVA assuming a minimal statistical significance ratio of 95%. Results: 86 patients had been diagnosed with increased triglycerides and were treated with monotherapy (statin), compared to 52 normolipidemic individuals. The proportion of dyslipidemic patients was similar in both sexes. The statin group members had a statistically significantly lower serum LDL (120 versus 137 mg/ dl) and higher serum triglycerides (203 versus 179 mg/dl) compared to the control group, with comparable HDL (43 versus 46). Well regulated diabetic patients (HbA1c< 7%) exhibited a better lipidemic profile compared to those still missing the goal (LDL 115 versus 128, triglycerides 148 versus 215, p < 0.001). Interestingly, triglyceride levels appeared further improved as glycemic control intensified, with a mean level of 126 for individuals with HbA1c< 6.5% compared to 194 for those between 6.5 and 7% (p < 0.0001). Conclusions: Hypertriglyceridemia in diabetes mellitus type II patients may not be adequately controlled via monotherapy, requiring more complicated treatment regimens. There are indications for a direct association of optimal triglyceride and glycemic control which may represent statin activity and/or improved dietary and exercise practices. Thus, hypertriglyceridemia is correlated with overall treatment compliance and should be used along with HbA1c for the chronic follow-up of diabetic patients. & Korrekturexemplar: Veröffentlichung (auch online), Vervielfältigung oder Weitergabe nicht erlaubt! & Diabetologie & Stoffwechsel 2011; 6: S1–S103
Postersitzung 3: Diabetes und die Fettzelle P99 Sex-specific differences in adipose tissue lipolysis during body weight cycling Benz V 1 , Bloch M 1 , Foryst-Ludwig A 1 , Böhm C 1 , Winkler R 1 , Wardat S 1 , Herbst L 1 , Giersch K 1 , Wiedmer P 2 , Spranger J 3 , Kintscher U 1 1 CharitØ Universitätsmedizin, Institute of Pharmacology, Berlin, Germany; 2 German Institute of Human Nutrition, Potsdam-Rehbrücke, Germany; 3 CharitØ Universitätsmedizin, Department of Endocrinology, Berlin, Germany Sex-specific differences in the regulation of body weight (BW) and adipose tissue (AT) distribution have been described recently. The underlying mechanisms are still largely unclear but point towards differences in AT metabolism. In a diet-induced obesity (DIO) mouse model we investigated sex-specific differences during BW cycling (reductionmaintenance-regain) and changes in AT lipolytic activity. Obesity was induced in C 57BL/6 J male (m) and female (f) mice (n = 10 per group) by 15 weeks of high-fat diet (HFD) feeding (60% kcal from fat). Subsequently BW was reduced (-25%) by caloric restriction with a low-fat diet (LFD, 10% kcal from fat). This reduced BW was maintained with adaptive feeding, and regain of BW was induced by ad libitum re-feeding of HFD. Measurement of energy expenditure (EE), body composition, and organ sampling were performed after each feeding period. An ex-vivo lipolysis assay (€ forskolin) was carried out in gonadal fat pads for detecting changes in AT lipolysis. Male mice exhibited accelerated BW gain under HFD reaching a plateau after 15 weeks, while females gained BW more slowly and constantly (BW gain week 0 to 15; m 134.6 € 1.7%, f 79.2 € 3.7%; p < 0.001). In this DIO state, lean mass-specific EE was significantly higher in females compared to males (p < 0.001) but was strongly reduced to the level of male mice EE after BW loss. Under caloric restriction females reached the -25% reduced BW faster than males (m 14.9 € 0.8; f 10.8 € 0.6 days). In both sexes reduction of BW was mainly mediated by a loss of AT (-50% of initial AT-mass). Interestingly, relative loss of gonadal AT was higher in females than in males. In consonance, the ex-vivo lipolysis assay during BW loss showed significantly higher rates of forskolin-stimulated lipolysis in females. In this phase females exhibited a lower respiratory quotient (RQ) supporting the hypothesis of enhanced lipolysis and lipid oxidation (RQ; m 0.87 € 0.02, f 0.84 € 0.02; p < 0.01). Analysis of AT lipolysis in estrogen receptor alpha (ERa) knock out mice indicated that sex-dependent regulation of lipolysis depends on the presence of ERa in AT. Finally, refeeding caused faster BW regain in males which could be explained by higher BW gain per kcal positive energy balance (m 0.11 € 0.01 g; f 0.08 € 0.03 g; p < 0.05). The present study shows a sex-specific regulation of BW cycling. Female mice responded to caloric restriction with higher lipolytic activity, enhanced loss of gonadal AT and augmented metabolic changes. Sexual dimorphisms in BW cycling likely involve ERa-dependent regulation of AT metabolism providing a potential therapeutic target. Funding: DFG (KFO 218/0) P100 Auswirkungen von „Weight cycling“ auf die Lebenserwartung bei Mäusen Kern M 1 , Klöting N 2 , Hebebrand J 3 , Stumvoll M 1 , Blüher M 1 1 Universität Leipzig, Department für Innere Medizin, Medizinische Klinik III, Leipzig, Germany; 2 Universität Leipzig, Integriertes Forschungs- und Behandlungszentrum (IFB), Leipzig, Germany; 3 Universität Duisburg-Essen, Department of Child and Adolescent Psychiatry and Psychotherapy, Duisburg, Germany Fragestellung: Die Prävalenz der Adipositas ist in den letzten Jahren deutlich angestiegen. Weltweit sind mehr als 170Mio Menschen betroffen. Viele Therapien zur Reduktion des Übergewichts liegen in zahlreichen Sportprogrammen, Medikation und auch Diäten. Leider belegen die Therapieergebnisse nur unzureichende Ergebnisse. Vielfach werden sogenannte „Jo-Jo“ Effekte beschrieben. Da es bis dato keine in vivo Studien gibt, die belegen, dass wiederholte Diäten als Therapie die Lebenszeit positiv beeinflusst, soll hier überprüft werden, in wieweit intermittierende Phasen hypokalorischer Ernährung die Lebenserwartung beeinflusst. Methodik: In den Mausstämmen 129S 6/SvEvTac (N = 90) und C 57BL/6NTac (N = 90) wurden die Auswirkungen einer kontinuierlichen kalorischen Restriktion, einer lebenslangen Hochfettdiät (Sniff, E15772 – 34) und einem Weight cycling, das durch einen Wechsel zwi- 46. Jahrestagung der Deutschen Diabetes-Gesellschaft | 1. – 4. Juni 2011, Leipzig schen den beiden extremen Ernährungsformen jeweils in 4 Wochen auf die Lebenserwartung untersucht. Die Körpermasse wurde wöchentlich erfasst. Die Insulintoleranz wurde im Alter von 24 Wochen überprüft und der HbA1c wurde nach einem Jahr analysiert. Außerdem erfolgte die Ermittlung des Grundumsatzes mittels Metabolischer Kammern (TSE, Bad Homburg, Deutschland). Ergebnisse: Die mittlere Lebenserwartung der Tiere unter Weight cycling (129S 6/SvEvTac Mittleres Sterbealter: 21,5 € 5 Monate und C 57BL/6NTac 21,5 € 3,5 Monate) war vergleichbar mit dem der Kontrolltiere mit Normalfutter (129S 6/ SvEvTac Mittleres Sterbealter: 23,5 € 5 Monate und C 57BL/6NTac 21,1 € 4 Monate). Die Kontrollgruppe auf hochkalorischer Diät lebte im Mittel 3,5 Monate kürzer als die beiden anderen Gruppen (129S 6/SvEvTac Mittleres Sterbealter: 20,5 € 5 Monate und C 57BL/6NTac 17,1 € 4,8 Monate). Diese Beobachtung war unabhängig vom Mausstamm. Im Vergleich der Lebenserwartung zwischen den Stämmen lebten die 129S 6/SvEvTac Tiere im Mittel 1,5 Monate länger als die C 57BL/6NTac Tiere. Weitere signifikante Unterschiede zeigten sich in der Insulintoleranz, HbA1c sowie im Grundumsatz. Schlussfolgerung: Weight cycling verbessert gegenüber einer lebenslangen Hochfettdiät signifikant die Lebenserwartung. Supported by NGFNplus (Grant No 01GI0827) P101 Das besondere angiogenetische und inflammatorische Potential perivaskulärer Fettzellen im Vergleich zu subkutanen und viszeralen Fettzellen Siegel-Axel D 1 , Dolderer J 2 , Rittig K 1 , Balletshofer B 1 , Machann J 3 , Staiger H 1 , Machicao F 1 , Stock U 4 , Häring HU 1 1 Universitätsklinik Tübingen, Medizinische Klinik IV, Tübingen, Germany; 2 BG Unfallklinik, – Klinik für Plastische-, Hand-, Rekonstruktive- und Verbrennungschirurgie, Tübingen, Germany; 3 Universitätsklinik Tübingen, Diagnostische und Interventionelle Radiologie, Sektion für Experimentelle Radiologie, Tübingen, Germany; 4 Universitätsklinik Tübingen, Thorax-, Herz- und Gefäßchirurgie, Tübingen, Germany Fragestellung: Bluthochdruck, Dyslipidämie und Typ II-Diabetes sind mit der Adipositas assoziiert. Adipöses Gewebe sezerniert Zyto- und Chemokine (Adipokine), die direkt oder indirekt mit den Insulinsignaltransduktionswegen interagieren. Zudem werden inflammatoryische Zytokine und angiogenetische Faktoren freigesetzt. Perivaskuläre Fettzellen (PVFZ) nehmen eine Sonderstellung ein, da sie ein ektopes Fettgewebe bilden, das ohne anatomische Barriere direkt an die Adventitia der arteriellen Gefäßwand angrenzt. Eine kürzliche Studie unserer Arbeitsgruppe konnte zeigen, dass die Masse an perivaskulärem Fett (PVF) in Patienten negativ mit der Insulinsensitivität und dem postischämisches Blutfluss korreliert. Das Expressionsmuster und das sekretorische Potential humaner PVFZ sollte daher mit subkutanen (SKFZ) und viszeralen (VFZ) verglichen werden. Methodik: PVFZ, SKFZ und VFZ wurden aus verschiedenen Patienten frisch isoliert und mit arteriellen Endothelzellen co-kultiviert. Mithilfe von Microarray- und Luminex- Technologien wurde ein Screening zahlreicher angiogetischer, metabolischer und inflammatorischer Faktoren auf Proteinebene und mRNA- Ebene (real-time PCR) bei allen drei Zellarten durchgeführt. Einzelzellkulturen wurden außerdem mit Co-Kulturen und undifferenzierte mit differenzierten Fettzellen verglichen. Spezifische ELISA gegen Hepatocyte-Growth Factor (HGF) in Zellkulturüberständen und Serum wurden schließlich für eine kombinierte in vitro- und in vivo-Studie durchgeführt. Mithilfe des Ganzkörper-MRT-Imaging wurde die Masse an PVF bei 95 Patienten gemessen und parallel dazu die Serum-HGF-Spiegel bestimmt. Ergebnisse: Die Konzentration und das Expressionsmuster der von PVSZ sezernierten Proteine unterscheidet sich deutlich von SKFZ und VFZ. Es zeigten sich signifikant höhere Spiegel der angiogenetischen Proteine HGF-1, FGF-acidic, VEGF, serpin-E1, TSP-1 and IGFBP-, sowie des proinflammatorischen MCP-1. Außerdem konnten vor allem die metabolischen Proteine Serpin 1 und Visfatin, aber auch Adiponektin, Leptin, Resistin, Fetuin A und Apelin nachgewiesen werden. Unter den angiogenetischen Faktoren war insbesondere HGF in PVSZ deutlich höher exprimiert. HGF stellt einen sehr potenten angiogenetischen Faktor und ein Zytokin dar, das sowohl in der Hämatopoiese als auch Vaskulogenese eine wichtige Rolle spielt. Die Bestimmung der Serum-HGF- Spiegel in Patienten mit viel oder wenig PVF, SKFZ und VFZ zeigte, dass PVF als einziges Fettkompartiment mit den HGF-Spiegeln korrelierte. Schlussfolgerungen: PVFZ nehmen sowohl anatomisch, als (patho-)physiologisch eine Sonderstellung zwischen verschiedenen Fettgeweben ein. Durch ihr hohes angiogenetisches und proinflammatori- & Korrekturexemplar: Veröffentlichung (auch online), Vervielfältigung oder Weitergabe nicht erlaubt! & Diabetologie & Stoffwechsel 2011; 6: S1–S103 S39
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