Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

6. XCoREST participa en el establecimiento del destino neural.
En embriones de Xenopus el patrón de expresión de XREST/NRSF es
muy similar al de XCoREST, el cual se expresa en la región lateral de la placa
neural en estadío 13 y posteriormente en los subdominios neurogénicos durante
la neurogénesis primaria (de la Calle-Mustienes y cols., 2001; Armisen y cols.,
2002). Estos antecedentes son compatibles con la idea de que la participación
de XREST/NRSF en la neurogénesis es dependiente de su interacción con
XCoREST. Para probar esta idea disminuimos los niveles de XCoREST a
través de la inyección de un morfolino antisentido (MoXCoREST) diseñado
contra la secuencia de inició de la traducción. Los embriones inyectados con 10
ng de MoXCoREST presentan expansión lateral de Sox2 y disminución de su
expresión en las células que expresan el marcador de linaje β-gal (Figura 26).
Complementariamente, se observó expansión lateral de los dominios de
expresión de msx-1 y XSlug, y a diferencia de los efectos observados al
inyectar 40 ng de MoXREST o 500 pg de dnXREST (inducido en la blástula
tardía), no se observó disminución de la expresión de estos marcadores (Figura
26).
Para probar si XREST/NRSF y XCoREST interactúan genéticamente,
coinyectamos MoXREST en una concentración subumbral (20 ng) junto con 10
ng de MoXCoREST. Los embriones inyectados sólo con MoXREST no
presentan alteraciones significativas, excepto alteraciones en el desarrollo del
primordio del ojo (Figura 26, Tabla 8). Mientras que los embriones inyectados
con ambos morfolinos, muestran una mayor expansión de Sox2 e inhibición de
su expresión en las células que expresan el marcador de linaje (Figura 26,
Tabla 8). Concordante esto, se observó un mayor desplazamiento de msx-1 y
Slug y no se observó disminución de su expresión (Figura 26, Tabla 8).
Estos resultados sugieren que XCoREST interactúa con XREST/NRSF en el
establecimiento del territorio neural y que la disminución de su función inhibe la
adquisición del destino neural y no altera el destino de las células del borde de
la placa neural.
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