Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales
Animales
- Se mantuvo un vivero con Xenopus laevis silvestres adultos, hembras y
machos, alimentados con corazón de vacuno tres veces por semana y con un
ciclo luz-oscuridad de 12 horas.
Reactivos para la obtención y mantención de embriones y explantes
animales:
-Cisteína (Merck, Darmstadt, Alemania).
-Ficoll (Polisacarosa 400, Calbiochem, La Jolla, CA, EE.UU.).
-Hormona Gonadotrofina Coriónica Humana (hHGC) (Chorulon, Intervet,
Boxmeer, Holanda).
-MBS 10x (Modified Barth´s Saline): NaCl 880 mM, KCl 10mM, MgSO4 10 mM,
HEPES 50 mM pH 7,8, 25mM NaHCO3, pH 7,8 ajustado con NaOH 5M.
-MBS 1x/Ca: MBS1x, CaCl2 0,7 mM.
-MBS 0,1x: MBS 1x/Ca 0,1x
-MBS 0,5x: MBS 1x/Ca 0,5x
-MBS High-Salt: MBS1x/Ca, NaCl 108 mM.
Cultivo Celular:
-Medio de disección: MBS 0.5x
-Medio de disociación: NaCl 116 mM, KCl 0,67 mM, EDTA 0,4 mM y Tris 4,6
mM, pH 7,8 ajustado con HCl.
-Medio de cultivo: NaCl 116 mM, KCl 0,67 mM, MgSO4 1,31 mM, CaCl2 10 mM
y Tris 4,6 mM, pH 7,8 ajustado con HCl.
-Placas de cultivo Petri de plástico 35 mm de diametro (Falcon Primaria, Falcon,
EE.UU.).
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