Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

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DISCUSIÓN REST/NRSF fue descrito como un regulador negativo de los genes neuronales estructurales en células no neuronales diferenciadas y en progenitores neurales indiferenciados (Chong et al., 1995; Schoenherr y Anderson., 1995). Sin embargo, embriones de ratón con una deleción nula de REST/NRSF no presentan expresión ectópica de todos los genes neuronales analizados que poseen el elemento de unión a REST (RE-1/NRSF) en su promotor y además presentan retraso en el crecimiento y letalidad en estadio embrionario 11 (Chen et al., 1998). Lo que sugiere que durante el desarrollo embrionario REST/NRSF participa de otros procesos además de la regulación de los genes neuronales estructurales. Recientemente se ha descrito que REST/NRSF controla el tránsito de células troncales embrionarias a progenitores neurales y finalmente a neuronas diferenciadas y que los mecanismos moleculares asociados a la inhibición de la transcripción de los genes blanco son diferentes entre precursores neurales y células no neuronales diferenciadas (Ballas et al., 2005). En esta tesis se determinó que durante el desarrollo embrionario de Xenopus laevis, XREST/NRSF es necesario para la formación del patrón dorsoventral del ectodermo, para la adquisición del fenotipo epidermal y para regular la expresión del canal de sodio dependiente de potencial eléctrico Nav1.2. Junto con esto, se muestra evidencia que indica que durante la diferenciación de las neuronas espinales primarias XREST/NRSF modula la expresión de la corriente de sodio dependiente de potencial eléctrico. 97
1. XREST/NRSF regula la expresión de los genes neuronales estructurales durante la neurogénesis de Xenopus laevis. Al reevaluar los efectos de la interferencia de la función de XREST/NRSF desde etapas tempranas del desarrollo embrionario, observamos la inhibición de la expresión de N-tubulin, SCG10 y NaV1.2 en embriones de néurula tardía, lo que confirma los resultados reportados por Armisen et al., (2002). Sin embargo, los cortes transversales de embriones en estadio de néurula y el análisis morfológico de embriones completos en estadio de organogénesis tardía revelaron que parte del efecto observado desde vistas dorsales es debido a malformaciones del tubo neural, las cuales enmascaran la expresión disminuida de N-tubulin, SCG10 y XNaV1.2. Junto con esto, los embriones con interferencia de la función de XREST/NRSF desde la gástrula tardía presentan disminución de la penetrancia y expresividad del fenotipo observado. Estos datos sugieren que la inhibición de la expresión de los genes neuronales estructurales en el tejido neural es un fenómeno que podría ser debido a múltiples defectos asociados a la interferencia de XREST/NRSF durante el desarrollo más temprano, al menos desde el proceso de inducción neural. Para poner a prueba estos razonamientos analizamos si los fenotipos observados en etapa de néurula tardía, cuando ya se ha formado el tubo neural, se reproducían en estadio de néurula temprana, donde la placa neural aun está desplegada y los dominios neurogénicos son facilmente distinguibles. Observamos que la disminución de la función de XREST/NRSF resulta en la inhibición de la expresión de N-tubulin en los dominios neurogénicos posteriores y en la placoda trigeminal, lo que indica que el fenotipo observado en los embriones de estadio de néurula tardía no sólo es producto de los defectos morfológicos del tubo neural o de una alteración en la mantención de la expresión de estos genes. Al analizar la expresión de NaV1.2 observamos expresión ectópica y prematura de su transcrito, un efecto en sentido opuesto al de N-tubulin. Este dato se ajusta al modelo clásico de la función de REST/NRSF como un represor 98
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