Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

-MEMPFA (MOPS 0,1 M pH 7,0 EGTA 2 mM, MgSO4 1 mM, paraformaldehido
4%).
-Metanol (Merck, Darmstadt, Alemania).
-MgCl2 (Merck, Darmstadt, Alemania).
-MOPS, ácido 3-[N-morfolino] propanosulfónico (Sigma, St. Louis, EE.UU.).
-NBT, Cloruro de 4-nitro blue tetrazolium (100 mg/mL en dimetilformamida)
(Boehringer Mannheim, Alemania).
-Paraformaldehido (Sigma, St. Louis, EE.UU.).
-PBS 1X (Na2HPO4 10 mM, NaH2PO4 1,7 mM, NaCl 200 mM, pH 7,4).
-PTw (Tween 20 0,1% (v/v) en PBS 1X).
-RNA de levadura (Sigma, St. Louis, EE.UU.).
-Trietanolamina (Sigma, St. Louis, EE.UU.).
-TRIS (Merck, Darmstadt, Alemania).
-Tween 20 (Sigma, St. Louis, EE.UU.).
-Solución AP (TRIS 100 mM, MgCl2 50 mM, NaCl 100 mM, Tween 20 0,1%
(v/v), pH 9,5).
-Solución de blanqueo: H2O2 1,5%, PBS 1X, 30 mL sol. de hibridación por 10
mL solución).
-Solución de lavado de sonda 1 (formamida 50%, SSC 2X, Tween 20 0,1% v/v).
-Solución de lavado de sonda 2 (formamida 25%, SSC 2X, Tween 20 0,1% v/v).
-Solución de lavado de sonda 3 (formamida 12,5%, SSC 2X, Tween 20 0,1%
v/v).
-Solución de lavado de sonda 4 (SSC 2X, Tween 20 0,1% v/v).
-Solución de lavado de sonda 5 (SSC 0,2X, Tween 20 0,1% v/v).
-SSC 20X (NaCl 3 M, citrato de sodio 0,3 M pH 7,4).
-Solución revelado β-gal (K3Fe(CN)6 20 mM, K4Fe(CN)6*3H2O 20 mM, X-gal
0.1% en PBS 1x libre de ribonucleasas)
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