Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

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de ac y sc es seguida por la de as (Brand et al., 1993; Dominguez y Campuzano, 1993; Jarman et al., 1993). En Xenopus la activación de la cascada genética que da cuenta de la diferenciación neuronal en los dominios neurogénicos se inicia con la expresión del gen perteneciente a la familia de proteínas bHLH neurogenin-related 1 (Xngnr-1) (Figura 7). La expresión X-ngnr-1 se detecta desde la gástrula temprana (estadio 10.5) en la placa neural presuntiva de manera difusa mientras que la expresión de X-Delta-1 aun no es detectada. En estadío 11.5 ambos genes se expresan manera punteada en tres parches bilaterales con respecto al eje mediolateral del embrión, lo que indica que la expresión de X-ngnr-1 prefigura la expresión de X-Delta-1 (Bellefroid et al., 1996; Ma et al., 1996). Estos parches definen los territorios medial, intermedio y lateral, desde donde posteriormente se diferenciarán las motoneuronas, interneuronas y neuronas sensoriales primarias, respectivamente (Ma et al., 1996) (Figura 8). En este estadio aún no se detecta la expresión de XNeuroD, que tambien pertenece a la familia bHLH, ni de N-tubulin, que es un marcador de neuronas recién diferenciadas (Oschwald et al., 1991; Lee et al. 1995). En estadío 13.5 el mRNA de XNeuroD es detectado en finas bandas de células solapándose con el dominio de expresión más amplio de X-ngnr-1. La misma secuencia de expresión es detectada en la placoda trigeminal. La sobreexpresión de X-ngnr-1 resulta en la expresión ectópica y prematura de X-Delta-1, XNeuroD y N-tubulin en el ectodermo neural y no neural, con un patrón menos punteado que el normal. De manera semejante, la sobreexpresión de XNeuroD resulta en neurogénesis ectópica y prematura, sin activar la expresión de X-ngnr-1 (Lee et al., 1995; Ma et al., 1996). El fenotipo neurogénico asociado a la sobreexpresión de X-ngnr-1 y XNeuroD junto con su patrón de expresión secuencial sugieren que estos genes forman una cascada unidireccional en la cual X-ngnr-1 induciría la expresión de XNeuroD y este a su vez la de N-tubulin (Figura 7). La activación constitutiva de la vía de Notch, a través de la expresión de su dominio intracelular (Notch ICD ), inhibe la expresión de X-ngnr-1 y su capacidad de inducir 21
neuronas ectópicas cuando es sobreexpresado. De manera opuesta, el bloqueo de la inhibición lateral mediante la expresión de una forma dominante negativa de X-Delta-1 (X-Delta-1 stu ) incrementa la densidad de celulas X-ngnr-1 positivas en los dominios neurogénicos (Ma et al., 1996). Estos datos junto al patrón de expresión punteado de X-ngnr-1, XNeuroD y N-tubulin en los dominios neurogénicos indican que al igual que en Drosophila la expresión de los genes proneurales es regulada por el mecanismo de inhibición lateral (Figura 6 y 7). Figura 7. Modelo de la cascada genética que controla la determinación y diferenciación neuronal. Los genes neuralizantes y la actividad de los genes del prepatrón inducén la expresión de X-ngnr-1 y el inicio de la cascada neurogénica. En rojo se representan los genes proneurales de la familia bHLH, en amarillo los genes neurogénicos, en naranja los efectores de los proneurales y moduladores de la cascada y en azul los genes neuronales estructurales. A la derecha se representa una célula vecina donde la neurogénesis ha sido inhibida por el mecanismo de inhibición lateral. 3.3 Posicionamiento de los cluster proneurales, genes del prepatrón. En Drosophila la expresión de los genes del complejo asc en cada cluster proneural es dirigida por elementos reguladores en cis (enhancers) que 22
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