Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

no se observa represión de SCG10 y NFM que también poseen un RE-1 en su
región reguladora (Paquette et al., 2000).
Recientemente establecimos que XREST/NRSF se expresa
tempranamente durante la neurogénesis en la región dorsal del embrión de
Xenopus laevis, para posteriormente restringirse al sistema nervioso central del
renacuajo. Mediante RT-PCR de neuronas espinales primarias aisladas,
demostramos la coexpresión de XREST/NRSF y N-tubulin. La sobreexpresión
de la isoforma humana causa la muerte de la totalidad de los individuos durante
la gastrulación, fenotipo que es rescatado por la coexpresión de XREST-DBD.
En tanto, la expresión de XREST-DBD resulta en el aparente silenciamiento de
la expresión de los genes neuronales estructurales Nav1.2, N-tubulin y SCG10
(Armisen et al., 2002). Estos resultados contrastan notablemente con la función
descrita para REST/NRSF y sugieren que esta proteína funcionaría como un
activador, o al menos como un factor permisivo de la expresión de este tipo de
genes. Ya que la inyección del mensajero de XREST-DBD en estadío de dos
células conduce a la expresión de la proteína desde etapas tempranas del
desarrollo, los fenotipos observados podrían ser el producto de perturbaciones
en procesos previos a la diferenciación neuronal. En Xenopus, una de las
estrategias experimentales empleadas para el estudio de la función de
proteínas nucleares en etapas específicas del desarrollo embrionario, es la
generación de quimeras compuestas por la proteína en cuestión, o de dominios
de ésta, fusionada al dominio regulatorio del receptor de glucocorticoides (GR).
Se ha descrito que estas fusiones una vez traducidas permanecen unidas a la
hsp90 en ausencia de glucocorticoides y que el tratamiento con dexametasona
de embriones inyectados con el mRNA que codifica para ellas, libera las
fusiones proteicas de la hsp90 destinándolas al núcleo (Kolm et al., 1995). De
esta manera, la expresión de una forma dominante negativa inducible que
consta del dominio de unión a DNA de XREST/NRSF fusionado al GR
(dnXREST), inducida en la blástula tardía resulta en una aparente expansión de
la placa neural, en la expresión ectópica del canal de sodio Nav1.2 tanto en
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