Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

More documents

Recommendations

Info

Figura 10. Mecanismo de silenciamiento de los genes neuronales estructurales en células no-neuronales diferenciadas. REST-CoREST recluta un complejo modificador de la cromatina que incluye HDACs 1y 2, demetilasa de histona en K4, y la metiltransferasas de histonas en K9 (HMTasesK9). La metilación en los residuos de lisina 9 (mK9) forma sitios de unión para la proteína de heterocromatina 1 (HP1) la que promueve la condensación de la cromatina. El RE-1/NRSF y las regiones adyacentes se encuentran metiladas en CpG (m) las que se asocian a MeCP2. MeCP2 también se asocia al complejo Sin3-HDAC. La metiltranferasa de DNA (DNMT1) es reclutada a los sitios metilados adyacentes al RE-1/NRSF. Junto con esto REST/NRSF recluta a la SCP la que bloquearía la actividad de la RNA pol II (extraido de Ballas y Mandel, 2005). 4.2.2 Mecanismo de regulación en células troncales embrionarias. El silenciamiento de la cromatina de los genes neuronales estructurales en células no-neuronales diferenciadas es estable, heredable y se conserva a a lo largo de la vida del animal. En contraste, las células troncales embrionarias, que también son no-neuronales, aun poseen la capacidad de proliferar y la competencia para dar origen a distintos destinos celulares. Esto sugiere que el mecanismo de silenciamiento en las células troncales embrionarias (ESCs) y en progenitores neurales (NPs) podría ser diferente al de las células no-neuronales diferenciadas (DNNCs) (Ballas y Mandel., 2005). Al igual que en las DNNCs, REST/NRSF está unido al RE-1/NRSE junto a los cofactores CoREST, mSin3, HDACs y MeCP2 en las ESCs, y a diferencia de las DNNCs la región genómica circundante al RE-1 no se encuentra metilada en CpG, ni en K9 de la histona H3 y se observa una disminución en los niveles de la metiltransferasa G9 31
(Ballas et al., 2005) (Figura 11). La cromatina de los genes neuronales en ESCs está enriquecida en di- y trimetilación de K4 en la histona H3 (Ballas et al., 2005), modificación que está asociada normalmente con genes en transcripción activa (Sims et al., 2003). Junto con esto, en ESCs y no en DNNCs la RNA polimerasa II se encuentra presente en los sitios RE-1 de la región 5’ no traducida de numerosos genes neuronales (Ballas et al., 2005) (Figura 11). Yeo et al., (2005), muestran que REST/NRSF reclutaría a la fosfatasa pequeña 1 del carboxilo terminal de la RNA Pol II (SCP1) a los promotores de genes neuronales que poseen RE-1. SCP1 fosforila el dominio carboxilo terminal de la RNA Pol II e inhibe su actividad. Al igual que REST/NRSF se expresa en tejido no neuronal y progenitores neurales de la medula espinal. La pérdida de función de SCP1 conduce a la activación de genes neuronales blancos de REST/NRSF. La pérdida de función de REST/NRSF en conjunto con la de SCP1 resulta en una mayor activación de genes neuronales en células troncales P19. Aunque la evidencia experimental no descarta que SCP1 sea reclutada a los promotores de genes neuronales o de genes que promueven la diferenciación neuronal por otros factores de unión a DNA. Los resultados expuestos sugieren que REST/NRSF funciona como un andamio molecular para SCP1 y de esta manera es compatible con la idea de que SCP1 forma parte del mecanismo por el cual REST/NRSF inhibe la actividad de la RNA Pol II en los genes neuronales de ESCs (Yeo et al., 2005) (Figura 11). Junto con la modulación de la RNA Pol II, la actividad de HDACs y las modificaciones epigenéticas de la cromatina de genes neuronales en células troncales mediada por REST/NRSF es compatible con un estado inactivo, pero permisivo a una activación subsecuente. Claramente existen diferencias en el estado de represión de los genes neuronales en células troncales y en células no-neuronales diferenciadas. Si bien en ambos estados se encuentra presente la actividad HDAC, la inhibición de esta actividad sólo libera la represión de los genes neuronales en ESCs y en células troncales neurales de adultos (Ballas et al., 2005). Estos datos son concordantes con la evidencia que muestra que la expresión de una quimera 32
Page 1 and 2: Universidad de Chile, Facultad de M
Page 3 and 4: Quisiera agradecer muy especialment
Page 5 and 6: Hipótesis……………………
Page 7 and 8: 6. Función de XCoREST en el la esp
Page 9 and 10: Índice de figuras Figura 1. Experi
Page 11 and 12: Lista de publicaciones - Olguín P,
Page 13 and 14: embriones de Xenopus desde la blás
Page 15 and 16: laevis the ectoderm is patterned at
Page 17 and 18: Posteriormente, en otros vertebrado
Page 19 and 20: 1.3 Inductores neurales y vías de
Page 21 and 22: formación de la placa neural y la
Page 23 and 24: Figura 3. Modelos de inducción neu
Page 25 and 26: destinos dependiendo de su localiza
Page 27 and 28: 16 Figura 4. Modelo de doble gradie
Page 29 and 30: 3.2 Neurogénesis primaria en Xenop
Page 31 and 32: adoptar el destino neural para fina
Page 33 and 34: neuronas ectópicas cuando es sobre
Page 35 and 36: Skarmeta et al., 1996) . Zic2 supri
Page 37 and 38: etrasan la diferenciación neuronal
Page 39 and 40: genes reporteros (ej. lacZ) que con
Page 41: manifiestan en la desacetilación d
Page 45 and 46: corticales aislados y tratados con
Page 47 and 48: 4.2.4 Función de REST/NRSF en neur
Page 49 and 50: 1/NRSE mutado se expresa en gran pa
Page 51 and 52: silvestres. Sin embargo, en estadio
Page 53 and 54: tejido neural, como también en la
Page 55 and 56: participar en la neurogénesis a tr
Page 57 and 58: -Pinzas nº 5 (A. DUMONT y FILS, Su
Page 59 and 60: -MEMPFA (MOPS 0,1 M pH 7,0 EGTA 2 m
Page 61 and 62: -Bromuro de Etidio (GIBCO BRL, Cali
Page 63 and 64: concentración de mRNA a inyectar s
Page 65 and 66: Recolección de embriones. Para el
Page 67 and 68: Técnicas de Biología Molecular. A
Page 69 and 70: histona H3 fosforilada (Upstate) en
Page 71 and 72: Síntesis de ribosondas para hibrid
Page 73 and 74: Hibridación in situ (ISH). Los emb
Page 75 and 76: RESULTADOS 1. Clonamiento del cDNA
Page 77 and 78: Figura 14. Alineamiento de la secue
Page 79 and 80: 3. Participación de XREST/NRSF en
Page 81 and 82: Figura 16. La interferencia de la f
Page 83 and 84: 3.2 La interferencia de la función
Page 85 and 86: 74 Figura 17. La interferencia de l
Page 87 and 88: 4. Participación de XREST/NRSF en
Page 89 and 90: Figura 19. La interferencia de la f
Page 91 and 92: 4.2 La sobreexpresión de XREST/NRS
Page 93 and 94:
4.3 Los fenotipos ectodérmicos aso
Page 95 and 96:
4.4 La sobreexpresión de XREST1 no
Page 97 and 98:
4.5 La interferencia de la función
Page 99 and 100:
4.6 XREST/NRSF participa en la form
Page 101 and 102:
Figura 24. Los fenotipos asociados
Page 103 and 104:
Para poner a prueba esta idea se co
Page 105 and 106:
6. XCoREST participa en el establec
Page 107 and 108:
Figura 26. XCoREST participa en el
Page 109 and 110:
1. XREST/NRSF regula la expresión
Page 111 and 112:
100 2. La interferencia de la funci
Page 113 and 114:
102 actividad de Wnt y FGF inducen
Page 115 and 116:
104 letalidad, probablemente porque
Page 117 and 118:
106 XREST/NRSF neuraliza los explan
Page 119 and 120:
108 mutada en los dominios de fosfo
Page 121 and 122:
110 5. XREST/NRSF modula la adquisi
Page 123 and 124:
112 cuenta de un potencial de acci
Page 125 and 126:
114 al neuroectodermo. La inhibici
Page 127 and 128:
116 embargo, estos resultados deben
Page 129 and 130:
118 Ballas N, Battaglioli E, Atouf
Page 131 and 132:
120 Chitnis AB. (1999). Control of
Page 133 and 134:
122 Godsave SF and Slack JM. (1989)
Page 135 and 136:
124 Kallunki P, Edelman GM & Jones
Page 137 and 138:
126 Luther WH. (1935). Entwicklungs
Page 139 and 140:
128 Oppenheimer JM. (1936b). Transp
Page 141 and 142:
130 Spemann H & Mangold H. (1924).
Page 143 and 144:
132 Wilson PA, Hemmati-Brivanlou A.
show all

Participación del Factor Silenciador Neuronal Restrictivo - Tesis ...

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?