Guanacos y Vicu.as_1_141.p65 - SAG - Servicio Agrícola y Ganadero

II.- BIOLOGIA Y CONSERVACION
y analizados mediante electroforesis en agarosa (RAPD) o poliacrilamida (AFLP y
SSR). Las bandas de ADN que son variables o polimórficas entre distintos genotipos
(animales), son analizadas mediante paquetes estadísticos tales como NTSYS-pc o
PHILIPS. De esta forma, se calculan los índices de similitud genética entre cada
par de animales, valores que son usados en análisis de agrupamientos posteriores
basados en el algoritmo UPGMA (para una revisión, ver a Johns et al., 1997). Los
dendogramas o representaciones de componentes principales también fueron
realizados en NTSYS-pc.
RESULTADOS
ANALISIS MEDIANTE RAPD
La metodología de RAPD se basa en el estudio de marcadores “anónimos”,
es decir que los loci genéticos analizados no corresponden a genes conocidos a
priori, o, en otras palabras, no se requiere tener ninguna información previa de la
estructura genética de un animal para poder obtener información. Esto diferencia
a estos marcadores de otros, como los microsatélites, para los cuales es necesario
identificar regiones específicas del genoma donde se encuentran estas secuencias
repetidas. En el caso del RAPD, los partidores de PCR corresponden a secuencias
cortas (8 a 12 nt) diseñada aleatoriamente.
En un análisis basado en RAPD, una primera etapa corresponde a la
identificación de los partidores que sean más informativos (Cuadro 1) en un
determinado grupo de especies, usando un sub-grupo de genotipos
representativos. Posteriormente, la totalidad de los genotipos (animales) es
analizada con cada partidor seleccionado. En este caso, se analizaron entre 10
y 20 animales de cada especie. La Figura 1 ilustra una reacción con un grupo de
cada especie, usando el partidor OPA-17. En este caso, se trata de una separación
electroforética en un gel de agarosa, donde se logran separar efectivamente
fragmentos de entre 300 y 3.000 pb. Como se puede ver, el número de bandas
polimórficas es reducido (flechas laterales), aunque el número total de bandas
amplificadas es elevado. El hecho que de entre más de 200 partidores de RAPD
sólo unos pocos revelaran polimorfismos, es evidencia de una alta homogeneidad
genética entre las cuatro especies, lo que se correlaciona bien con su capacidad
de producir híbridos fértiles.
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