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Argomenti di ACTA Otorhinolaryngologica Italica
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Clinica Otorinolaringoiatrica del Dipartimento di Specialità
Medico-Chirurgiche dell’Università di Catania.
Di questi pazienti, 4 presentavano una recidiva a distanza
di alcuni anni dal primo intervento chirurgico.
In particolare, grazie alla collaborazione dell’Istituto di
Anatomia Patologica dell’Università di Catania, i campioni
sono stati fissati in formalina tamponata al 4% e inclusi
in paraffina secondo i metodi tradizionali. Le sezioni sono
state colorate con ematossilina-eosina. I PI naso sinusali
sono stati identificati secondo i criteri della classificazione
WHO (World Health Organization). L’iperespressione
delle proteine ER e PG sono state valutate tramite metodica
immunoistochimica (Dako Anti-Human Estrogen
Receptor α, clone 1D5; Novocastra Anti-Human Progesteron
Receptor, clone16). Il campione è stato sparaffinato
attraverso un passaggio di 10 minuti in xilolo. Le sezioni
sono state reidratate attraverso passaggi nella serie di etanolo
decrescente, rispettivamente 96°, 80° e 70° e infine
poste in PBS. Quindi sono stati effettuati due passaggi in
microonde per 10 minuti alla massima temperatura e per
5 minuti al 20% della potenza. Viene applicata la pepsina
a temperatura ambiente per 5 minuti, che smaschera i siti
antigenici mediante digestione proteolitica. La perossidasi
endogena è stata bloccata con un passaggio in H2O2 al
3%. L’anticorpo primario, diluito in PBS al 10%, è stato
applicato overnight in camera umida. Quindi è stato applicato
un anticorpo secondario biotinilato. La reazione è
stata evidenziata con diamino benzidina.
Le sezioni sono state contro colorate con ematossilina.
L’anticorpo ER marca le cellule positive al recettore estrogenico
α e l’anticorpo PGR marca le cellule positive al
recettore progestinico. I tumori sono stati considerati positivi
per ER e PGR solo in presenza di macchiature nucleari
inequivocabili.
L’intensità di macchiature e la percentuale delle cellule
positive sono stati semi quantificati per ogni anticorpo al
microscopio. L’intensità è stata classificata da 0 (assente)
a 4 (presente).
La percentuale delle cellule positive è stata valutata e classificata
come segue: 0 = nessuna cellula è stata marcata; 1
= 25% delle cellule marcate; 2 = 25-50% di cellule marcate;
3 = 50-70% di cellule marcate; 4 = 75-100% di cellule
marcate.
Risultati
Un totale di 17 campioni di PI (13 primari + 4 recidive) è
stato analizzato per evidenziare possibile espressione di
ER e PGR.
La nostra casistica comprendeva 11 uomini (64%) e 6
donne (35%) con un’età media di 55 anni (range compreso
tra 31 e 79).
In particolare otto PI (47%), erano a provenienza dal seno
mascellare, cinque (30%) dal seno frontale, ed altri 4
(23%) dai seni etmoidali.
Anche se il PI è circa quattro volte più comune negli uomini
che nelle donne, abbiamo ottenuto un numero paragonabile
di campioni da entrambi i sessi per eliminare la polarizzazione
del genere maschile nell’espressione recettoriale.
Dopo aver effettuato questa selezione iniziale, i campioni
di tessuto analizzati sono stati pertanto ottenuti a caso.
Tutti gli esemplari analizzati risultavano essere negativi
Fig. 1. Recettori per estrogeni negativi.
Fig. 2. Recettori per progesterone negativi.
per l’espressione di PGR, tranne cinque risultavano essere
debolmente positivi per l’espressione di ER.
Conclusioni
L’analisi dei risultati, mostra l’assenza di una positività
statisticamente significativa e pertanto i dati, sono sovrapponibili
ed in linea a quelli relativi allo studio condotto da
Siivonen descritto precedentemente.
Il PI rinosinusale, pertanto, è una patologia tumorale benigna
indipendente dal progesterone e dell’estrogeno, ed
i recettori di questi ormoni sono pertanto inadatti come
predittivi di recidiva o per possibili indici prognostici ed
obiettivi terapeutici.
Bibliografia
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