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Argomenti di ACTA Otorhinolaryngologica Italica 82 Clinica Otorinolaringoiatrica del Dipartimento di Specialità Medico-Chirurgiche dell’Università di Catania. Di questi pazienti, 4 presentavano una recidiva a distanza di alcuni anni dal primo intervento chirurgico. In particolare, grazie alla collaborazione dell’Istituto di Anatomia Patologica dell’Università di Catania, i campioni sono stati fissati in formalina tamponata al 4% e inclusi in paraffina secondo i metodi tradizionali. Le sezioni sono state colorate con ematossilina-eosina. I PI naso sinusali sono stati identificati secondo i criteri della classificazione WHO (World Health Organization). L’iperespressione delle proteine ER e PG sono state valutate tramite metodica immunoistochimica (Dako Anti-Human Estrogen Receptor α, clone 1D5; Novocastra Anti-Human Progesteron Receptor, clone16). Il campione è stato sparaffinato attraverso un passaggio di 10 minuti in xilolo. Le sezioni sono state reidratate attraverso passaggi nella serie di etanolo decrescente, rispettivamente 96°, 80° e 70° e infine poste in PBS. Quindi sono stati effettuati due passaggi in microonde per 10 minuti alla massima temperatura e per 5 minuti al 20% della potenza. Viene applicata la pepsina a temperatura ambiente per 5 minuti, che smaschera i siti antigenici mediante digestione proteolitica. La perossidasi endogena è stata bloccata con un passaggio in H2O2 al 3%. L’anticorpo primario, diluito in PBS al 10%, è stato applicato overnight in camera umida. Quindi è stato applicato un anticorpo secondario biotinilato. La reazione è stata evidenziata con diamino benzidina. Le sezioni sono state contro colorate con ematossilina. L’anticorpo ER marca le cellule positive al recettore estrogenico α e l’anticorpo PGR marca le cellule positive al recettore progestinico. I tumori sono stati considerati positivi per ER e PGR solo in presenza di macchiature nucleari inequivocabili. L’intensità di macchiature e la percentuale delle cellule positive sono stati semi quantificati per ogni anticorpo al microscopio. L’intensità è stata classificata da 0 (assente) a 4 (presente). La percentuale delle cellule positive è stata valutata e classificata come segue: 0 = nessuna cellula è stata marcata; 1 = 25% delle cellule marcate; 2 = 25-50% di cellule marcate; 3 = 50-70% di cellule marcate; 4 = 75-100% di cellule marcate. Risultati Un totale di 17 campioni di PI (13 primari + 4 recidive) è stato analizzato per evidenziare possibile espressione di ER e PGR. La nostra casistica comprendeva 11 uomini (64%) e 6 donne (35%) con un’età media di 55 anni (range compreso tra 31 e 79). In particolare otto PI (47%), erano a provenienza dal seno mascellare, cinque (30%) dal seno frontale, ed altri 4 (23%) dai seni etmoidali. Anche se il PI è circa quattro volte più comune negli uomini che nelle donne, abbiamo ottenuto un numero paragonabile di campioni da entrambi i sessi per eliminare la polarizzazione del genere maschile nell’espressione recettoriale. Dopo aver effettuato questa selezione iniziale, i campioni di tessuto analizzati sono stati pertanto ottenuti a caso. Tutti gli esemplari analizzati risultavano essere negativi Fig. 1. Recettori per estrogeni negativi. Fig. 2. Recettori per progesterone negativi. per l’espressione di PGR, tranne cinque risultavano essere debolmente positivi per l’espressione di ER. Conclusioni L’analisi dei risultati, mostra l’assenza di una positività statisticamente significativa e pertanto i dati, sono sovrapponibili ed in linea a quelli relativi allo studio condotto da Siivonen descritto precedentemente. Il PI rinosinusale, pertanto, è una patologia tumorale benigna indipendente dal progesterone e dell’estrogeno, ed i recettori di questi ormoni sono pertanto inadatti come predittivi di recidiva o per possibili indici prognostici ed obiettivi terapeutici. Bibliografia 1 Syrianen S, Happonen RP, Virolainen E, Siivonen L, Syrjänen K. Detection of human papillomavirus (HPV) structural antigens and DNA types in inverted papilloma and squamous cell carcinoma of the nasal and paranasal sinuses. Acta Otolaryngol 1987;104:334-34. 2 Fu YS. Histopathology of inverted papilloma and surgical implications. Am J Rhinology 1995;9:75-76. 3 Weber RS, Shillitoe EJ, Robbins KT, Luna MA, Batsakis JG, Donovan DT, et al. Prevalence of human papillomavirus in inverted nasal papillomas. Arch Otolaryngol Head Neck Surgery 1988;114:23-6. 4 Grenman R, Virolainen E, Shapira A, Carey T. In vitro effects of
L’espressione recettoriale estroprogestinica nel papilloma invertito rinosinusale Tamoxifen on UM-SCC head and neck cancer cell lines: Correlation with the estrogen and progesterone receptor content. Int J Cancer 1987;39:77-81. 5 Schuller DE, Abou-Issa H, Parrish R. Estrogen and progesterone receptors in head and neck cancer. Arch Otolaryngol Head Neck Surg 1984;110:725-7. 6 Ferguson BJ, Hudson WR, McCarty KS. Sex steroid receptor distribution in the human larynx and laryngeal carcinoma. Arch Otolaryngol Head Neck Surg 1987;113:1311-5. 7 Urba SG, Carey TE, Kudla-Hatch V, Wolf GT, Forastiere AA. Tamoxifen therapy in patients with recurrent laryngeal squamous carcinoma. Laryngoscope 1990;100:76-8. 8 Mattox DE, Von Hoff DD, McGuire WL. Androgen receptors and antiandrogen therapy for laryngeal carcinoma. Arch Otolaryngol Head Neck Surg 1984;110:721-4. 9 Siivonen L. Sex steroid receptors in papilloma, normal mucosa and polyps of the nose. ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec 1994;56:154-6. 83
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