You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
1 pav. CMV paþeisti pomidorø lapai<br />
Fig. 1. Cucumber leaves affected with CMV<br />
233<br />
termocikleryje „Ependorf Mastercycler Personal“ +37°C temperatûroje 60 min. <strong>ir</strong><br />
+70°C temperatûroje 10 min. DNR amplifikacija buvo atliekama á paruoðtà PGR<br />
miðiná (PGR vanduo, abu pradmenys: „Forward“ <strong>ir</strong> „Reverse“, dNTP miðinys, 10 x<br />
PGR buferis su MgCl 2<br />
<strong>ir</strong> rekombinantinë Taq polimerazë) (AB „Fermentas“, Lietuva)<br />
pridëjus t<strong>ir</strong>iamø mëginiø cDNR. AT-PGR buvo atliekama tokiu reþimu: +94°C –<br />
4 min., po to 40 ciklø (+94°C – 1 min., +52 arba +55°C – 2 min., +72°C – 2 min.)<br />
<strong>ir</strong> +72°C – 10 min. Gauti PGR produktai buvo analizuojami elektroforetiðkai (EF)<br />
naudojant 5% poliakrilamidiná gelá 1 x TBE buferyje, daþomi etidþio bromidu. Gautø<br />
cDNR amplifikuotø fragmentø juostelës EF gelyje buvo ryðkinamos <strong>ir</strong> fotografuojamos<br />
UV ðviesoje.<br />
Rezultatai. Pomidorus paþeidusiø kai kuriø v<strong>ir</strong>usø preliminariam biologiniam<br />
identifikavimui patv<strong>ir</strong>tinti buvo atrinkta per 10 v<strong>ir</strong>usiniø izoliatø ið lauko <strong>ir</strong> ðiltnaminiø<br />
pomidorø lapø ar vaisiø mëginiø. Stebëtø pomidorø v<strong>ir</strong>usiniai paþeidimai buvo labai<br />
áva<strong>ir</strong>ûs: margligës, mozaikos, þiediðkosios dëmëtligës, lapø iðaugos, lapalakðèiø <strong>ir</strong><br />
vaisiø deformacijos, áva<strong>ir</strong>aus pobûdþio augimo sutrikimai. Pomidorø mëginiai pagal<br />
v<strong>ir</strong>usiniø paþeidimø tipiðkiausius simptomus buvo iðt<strong>ir</strong>ti EM metodu. Visuose mëginiuose<br />
nustatyti sk<strong>ir</strong>tingos struktûros izometriniai v<strong>ir</strong>ionai.<br />
Agurkø mozaikos v<strong>ir</strong>usas (Cucumber mosaic cucumov<strong>ir</strong>us, CMV) buvo iðsk<strong>ir</strong>tas<br />
ið pomidorø ‘Ryèiai’ <strong>ir</strong> ‘Viltis’, augintø Këdainiø rajono laukuose. V<strong>ir</strong>usø paþeisti<br />
pomidorai buvo aptikti nedideliais þidiniais. Pomidorø lapalakðèiai buvo margi, susmulkëjæ,<br />
parudavusiomis gyslomis, labai deformuoti (1 pav.). Kai kuriø pomidorø<br />
lapai buvo siûliðki, nulinkusiomis þemyn v<strong>ir</strong>ðûnëmis. Tyrimo metu po diagnostiniø<br />
augalø inokuliacijos pas<strong>ir</strong>odë, kad v<strong>ir</strong>usas uþkrëtë Datura L., Gomphrena L., Nicotiana<br />
L., Cucumis L., Lycopersicon Mill, Tetragonia L. genèiø augalus, sukeldamas<br />
juose CMV bûdingus simptomus.<br />
Minëtø augalø nevalytø ekstraktø<br />
EM preparatuose nustatëme izometrinius<br />
(sferinius) su ryðkiu centru,<br />
apie 28 nm skersmens v<strong>ir</strong>ionus<br />
(2 pav.), bûdingus tik Cucumov<strong>ir</strong>us<br />
genties v<strong>ir</strong>usams. Remiantis<br />
augaluose indikatoriuose<br />
v<strong>ir</strong>uso sukeltø simptomø pobûdþiu,<br />
ypaè EM tyrimø v<strong>ir</strong>usiniø daleliø<br />
morfologiniø savybiø duomenimis,<br />
buvo nustatyta, kad t<strong>ir</strong>tuose pomidoruose<br />
v<strong>ir</strong>usinius paþeidimus sukëlë<br />
CMV (Francki <strong>ir</strong> kt., 1979).<br />
V<strong>ir</strong>uso identifikavimui patv<strong>ir</strong>tinti<br />
buvo panaudota AT-PGR. Totalinei<br />
RNR iðsk<strong>ir</strong>ti naudoti 2-jø pomidorø<br />
izoliatø CMV uþsikrëtæ Nicotiana<br />
glutinosa L. <strong>ir</strong> D. stramonium<br />
L. augalø uþðaldyti audiniai.<br />
Rezultatai elektroforezës akrilami-
Change language