sodininkystė ir daržininkystė 25(4)

daþniausiai susijæs su superoksido radikalø pertekliumi. Superoksido dismutazës (SOD)
izofermentas (EC 1.15.1.1) svarbiausias augalø antioksidacinëse reakcijose, nes paðalina
superoksido radikalus (O 2-
) dismutazës reakcijos metu. Ðiai reakcijai vykstant
susidaro vandenilio peroksidas ir deguonis. Vandenilio peroksido perteklius detoksikuojamas
kitø antioksidaciniø fermentø – katalazës ir peroksidazës. Antioksidaciniø
izofermentø aktyvumo padidëjimas daþniausiai siejamas su antioksidaciniu augalo
atsaku á sukeltà stresà (Blokhina ir kt, 2003). Augalo atsako intensyvumà á oksidaciná
stresà galima nustatyti pagal padidëjusá antioksidaciniø fermentø aktyvumà adaptacijos
metu. Yra duomenø, kad pakankamai didelis antioksidacinis fermentinis aktyvumas
gali apsaugoti augalà nuo oksidacijos paþaidø, tuo padidindamas augalo tolerantiðkumà
stresiniams veiksniams (Foyer, 1994).
Darbo tikslas – iðtirti tarprûðiniø atspariø ðalnoms bulviø hibridø adaptaciná
þemos temperatûros poveiká antioksidaciniø fermentø aktyvumui. Pagrindiniai uþdaviniai
– nustatyti atspariø ðalnoms somatiniø bulviø hibridø SOD elektroforezinius
spektrus, SOD aktyvumà, palyginti su tëvinëmis formomis ir ávertinti galimà SOD
izofermentø dalyvavimà adaptacijos þemai temperatûrai procese.
Tyrimo objektas ir metodai. Somatiniai bulviø hibridai yra paveldëjæ ið donoro –
laukinës rûðies Solanum commersonii Dun. genominës DNR fragmentus ir ágavæ
atsparumà ðalèiui (Proscevièius, 1987). Atsparios ðalèiui Solanum commersonii Dun.
rûðies ir kultûrinës veislës S. tuberosum veislës ‘Matilda’ somatiniai bulviø hibridai
(H188, H323, H269) auginami in vitro sàlygomis. Adaptacijos bandymai atliekami su
trijø savaièiø amþiaus kultûromis: kontroliniai augalai (K) auginami +22°C temperatûroje,
adaptacija (Ad) vyksta +6°C temperatûroje, esant 16/8 val. fotoperiodui.
SOD izofermentiniams tyrimams lapø auginiai imami po 7, 14 ir 21 dienø adaptacijos.
SOD iðskiriamas lapus homogenizuojant Na-K fosfatiniu buferiu, pH 7,8. SOD
elektroforetiðkai frakcionuojamas 4–10% PAAG pagal V. K. Laemmlá (1970). Bendras
SOD aktyvumas buvo nustatomas spektrofotometru. Metodas paremtas SOD
savybe inhibuoti NBT fotocheminæ reakcijà (Beyer, Fridovich 1987).
Baltymo koncentracija apskaièiuojama pagal BSA kalibracinæ kreivæ
(Bradford, 1976). Fotosintetiniai pigmentai nustatomi spektofotometru 100% acetone.
Statistinë analizë atlikta naudojant MS („Microsoft Corporation“) „Exel 2003“
statistinës analizës programiniø priedø paketà.
Rezultatai. Tiriant natyviø baltymø elektroforegramas, buvo nustatyti bulviø
superoksido dismutazës (SOD) izofermentiniai profiliai: atsparaus ðalèiui S. commersonii
Dun., jautrios ðalèiui Solanum tuberosum L. veislës ‘Matilda’ ir atspariø ðalnoms
H323, H188 hibridø SOD profiliai. Laukinës rûðies S. commersonii SOD spektras
susideda ið keturiø izoformø, kurios buvo paþymëtos SOD-1, SOD-2, SOD-3,
SOD-4 pagal elektroforeziná paslankumà (R f
). Numeracija pradedama anodo link nuo
lëèiausiai judanèios izoformos, kuriø R f
atitinkamai yra 0,30; 0,38; 0,42; 0,48.
Kultûrinës S. tuberosum veislës ‘Matilda’ spektrà sudaro ðeðios SOD izoformos,
paþymëtos SOD-2, SOD-3a, SOD-4, SOD-5, SOD-6, SOD-7, kuriø R f
yra
atitinkamai 0,38; 0,45; 0,48; 0,51; 0,56 ir 0,67. Lyginant tëvines formas tarpusavyje,
buvo nustatyta, kad dvi juostos – SOD-2 ir SOD-4 – aptinkamos ir laukinëje S. commersonii
rûðyje, ir kultûrinës rûðies S. tuberosum veislëje ‘Matilda’. Taèiau S. commersonii
spektrui bûdinga SOD-1 izoforma neaptinkama veislës ‘Matilda’ kontrolëje.
332