Download Abstractbuch (Freie Vorträge und Poster)

S96 45. Jahrestagung der Deutschen Diabetes-Gesellschaft | 12.–15. Mai 2010, Stuttgart
TNFalpha-induced IL-6 expression (43% reduction vs. TNFalpha alone;
p < 0.05). MCP-1 expression was regulated in a similar manner. In parallel,
adipocytokine expression was characterized. Treatment with C 21
(1 mM, for 48 h and 72 h) led to a significant reduction of a basal leptin
mRNA expression in adipocytes (1 € 0.1-fold to 0.4 € 0.03-fold; p < 0.01
for 48 h). Importantly, C 21 (0.1 to 10mM) did not induce PPARgamma
activity as described for certain ARBs, and consequently did not induce
adipocyte differentiation. To further determine the functional significance
of AT2R stimulation in the development of IR and adipose tissue
inflammation we next focussed on macrophages. In our in-vitro model,
PMA-differentiated THP-1 macrophages were treated with LPS (10 ng/ml
for 24 h) in parallel to C 21. Our results show a significant increase of IL-6
mRNA expression by LPS (4.6 € 0,3-fold vs. control; p < 0.001) as well as
IL-6 protein release, quantified with ELISA (Control: < 3,12 € 0,7 pg/ml
vs. LPS: 343.4 € 23.8 pg/ml; p < 0.001). Treatment with C 21 (1 mM) significantly
repressed LPS-induced IL-6 expression (LPS+C 21: 2.7 € 0.7fold
vs. control; p < 0.05 and 261.4 € 10.2 pg/ml; p < 0,001, respectively).
The present study demonstrates that direct AT2R stimulation results in
anti-inflammatory actions in 3T3-L 1 adipocytes and human monocytic
cells. Anti-inflammatory properties of AT2R activation by C 21 may be an
essential mechanism for potential anti-diabetic actions, since adipose
tissue inflammation prominently contributes to the pathogenesis of systemic
IR.
P286
VEGF und CD36 als Schlüsselmoleküle im
Crosstalk zwischen perivaskulärem Fett und
humanen glatten Muskelzellen
Schlich R 1 , Sell H 1 , Eckel J 1
1 Deutsches Diabetes-Zentrum, Institut für Klinische
Biochemie und Pathobiochemie, Düsseldorf, Germany
Fragestellung: Ein zentraler Risikofaktor für die Entstehung von Atherosklerose
ist die erhöhte Fettgewebsmasse bei Adipositas. Besonders
perivaskuläres Fett ist im Zusammenhang mit Adipositas und dem metabolischen
Syndrom als Auslöser für Inflammation und Proliferation in
der Gefäßwand beschrieben. In früheren Studien konnten wir zeigen,
dass Fettzell-konditionierte Medien (CM) die Proliferation und Migration
von glatten Muskelzellen (SMC) induziert und zu einer erhöhten
ICAM-1 Expression führt. Die Kombination von CM und Ölsäure (OA)
steigert die Proliferation synergistisch, induziert iNOS Expression und
aktiviert verschiedene pro-inflammatorische und proliferative Signalwege.
Ziel dieser Studie ist es, Faktoren und Mechanismen zu identifizieren,
die für die Wirkung von CM verantwortlich sind. Methodik: CM wurden
von in vitro differenzierten humanen Adipozyten über 48 h gewonnen
und die Sekretion von Adiponectin, IL-6 und VEGF mit ELISAs bestimmt.
Proliferation von humanen SMC aus Koronararterien wurde mittels
BrdU-Einbau in die DNA gemessen. Die Expression von CD 36 wurde
mittels Western Blot analysiert. Ergebnisse: Der proliferative Effekt verschiedener
CM korrelierte negativ mit ihrer Adiponectin Konzentration,
aber nicht mit IL-6. Der Gehalt an VEGF korrelierte hochsignifikant mit
der proliferativen Wirkung von CM. Die VEGF Konzentration konnte
nach Inkubation mit CMOA um das 2-fache gegenüber CM oder OA
alleine gesteigert werden, so dass auch die SMC zu einer gesteigerten
VEGF Sekretion beitragen. VEGF alleine zeigte eine 2,5-fache Erhöhung
der Proliferation und die Kombination von VEGF und OA wirkte additiv
(5-fach). Um die Bedeutung von VEGF für die von uns beobachteten
Effekte weiter zu charakterisieren, haben wir VEGF mithilfe eines spezifischen
Antikörpers blockiert und konnten die proliferative Wirkung von
CM, OA und CMOA signifikant hemmen (um 56% (CM, OA) bzw. 45%
(CMOA)). Dagegen war kein Effekt durch die VEGF-Blockierung auf die
unbehandelten Zellen bzw. die FCS-Kontrolle zu beobachten. Außerdem
konnten wir zeigen, dass CM unabhängig von OA die Expression von
CD 36 signifikant erhöht (2,5-fach). CD36 gehört zur Familie der Scavenger
Rezeptoren und ist auch bekannt als Fettsäuretransporter. Überdies
spielt CD36 eine pro-atherogene Rolle und konnte in verschiedenen
Zelltypen mit VEGF bzw. dem VEGF-Rezeptor in Zusammenhang gebracht
werden. Durch Silencing von CD36 konnte die proliferative Wirkung
von OA und CMOA um 46% bzw. 50% vermindert werden. Die
Verminderung von CD 36 hatte jedoch keinen Effekt auf die CM-induzierte
Proliferation. Schlussfolgerung: In dieser Studie konnte VEGF als
wichtiger Faktor für die proliferative Wirkung von CM identifiziert werden.
Die Steigerung der CD36 Expression durch CM könnte in diesem
Zusammenhang einen wichtigen Mechanismus darstellen, da CD36 Silencing
die OA- und CMOA-induzierte Proliferation der SMC hemmt.
P287
Auswirkungen von Hypo- und Hyperglykämie auf
Serum-GH-Konzentrationen bei Patientinnen mit
Polyzystischem Ovarialsyndrom vs. gesunde
Frauen mit und ohne orale Kontrazeptiva
Friedrich A 1 , Ludwig A 2 , Voss M 1 , Rudolf S 1 , Diedrich K 2 ,
Schweiger U 1 , Oltmanns KM 1
1 Klinik für Psychiatrie und Psychotherapie Universität zu
Lübeck, Lübeck, Germany, 2 Klinik für Gynäkologie und
Geburtshilfe Universität zu Lübeck, Lübeck, Germany
Fragestellung: Wachstumshormon und Blutglukose beeinflussen einander
wechselseitig. Die Auswirkungen von Wachstumshormon (GH)-Gabe
auf den Glukosestoffwechsel sind aus früheren Studien bekannt. Die
Effekte von Hyper- und Hypoglykämien auf die Serum-GH-Konzentrationen
dagegen wurden bislang nicht untersucht. Ziel unserer Studie ist
es daher, diesen Zusammenhang in Frauen mit drei unterschiedlichen
Sexualhormonprofilen zu untersuchen und miteinander zu vergleichen.
Methodik: Wir untersuchten sieben Patientinnen mit polyzystischem
Ovarialsyndrom (PCOS), fünfzehn gesunde Frauen mit (mK) und zehn
gesunde Frauen ohne (oK) orale Kontrazeption. Jede Studienteilnehmerin
durchlief eine hypo- und hyperglykämische Glukose-Clamp-Intervention.
Vor Beginn und kontinuierlich während der Intervention wurde
die GH-Konzentration im Blut bestimmt. Ergebnisse: Insgesamt zeigte
die Gruppe der PCOS-Patientinnen im Vergleich zu beiden anderen
Gruppen während Hypo- und Hyperglykämie die niedrigsten GH-Konzentrationen
(p < 0,008), während die oK-Gruppe im Vergleich zur mK-
Gruppe die höchsten GH-Werte erreichte (p < 0,001). Unter Hyperglykämie
fanden wir generell einen signifikanten Abfall (p = 0,028) und unter
Hypoglykämie einen signifikanten Anstieg der GH-Konzentration
(p < 0,001). In der oK-Gruppe war diese Reagibilität stark ausgeprägt,
während in der PCOS- und der mK-Gruppe diese Effekte deutlich abgeschwächt
waren. Schlussfolgerung: Unsere Daten zeigen eine abgeschwächte
Reagibilität von Serum-GH auf Hyper- und Hypoglykämie
bei PCOS-Patientinnen und gesunden Frauen unter Einnahme oraler
Kontrazeptiva. Wir vermuten, dass die erhöhten Sexualhormone ursächlich
für diese verringerte Reagibilität der GH-Achse sein könnten. Unsere
Daten sind insbesondere für Patientinnen mit Typ 1-Diabetes mellitus
von hoher klinischer Relevanz, da orale Kontrazeptiva aufgrund der verminderten
GH-Antwort auf Hyper- und Hypoglykämie möglicherweise
zum Auftreten der Hypoglykämiewahrnehmungsstörung beitragen können.
Postersitzung 30: Folgeerkrankungen, Muskel, Immunologie
P288
Diabetologie & Stoffwechsel 2010; 5: S1–S106 Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York · ISSN 1861-9002
InsR/FoxO1 signaling affects neuroanatomy of
hypothalamic POMC neurons
Plum L 1 , Lin HV 1 , Aizawa K 1 , Liu Y 1 , Wardlaw SL 1 ,
Zeltser LM 2 , Accili D 1
1 Columbia University, Department of Medicine, New York
City, United States, 2 Columbia University, Department of
Pathology, New York City, United States
The insulin-regulated transcription factor FoxO1 functions as a major
metabolic integrator in the hypothalamic feeding center and controls
melanocortinergic tone. By inhibiting FoxO1, Insulin receptor (InsR) signaling
regulates gene transcription in hypothalamic POMC neurons.
While a role of InsR/FoxO1 signaling in the development of neuronal
feeding circuits in the hypothalamus has become evident, knowledge
about the underlying mechanisms remains vague. Many studies have
investigated the role of the maternal environment in this context, but
the role of InsR/FoxO1 signaling in hypothalamic POMC neurons themselves
remains unknown. To investigate the role of InsR/FoxO1 signaling
for development and maintenance of these cells, we first examined
hypothalamic Pomc mRNA-expressing neurons by fluorescent in situ
hybridization in mice with hypothalamic deficiency of InsR (L 1). Neonatal
and pre-pubertal L1 mice showed no difference in the number of
Pomc-positive cells as compared to controls, suggesting that ontogeny of
POMC neurons is intact in these mice. In contrast, young adult (15week-old)
L 1 mice showed a 25% increase in the total number of neurons
expressing Pomc, most notably in the caudal arcuate nucleus of the
hypothalamus (Bregma Ÿ 1.4 to Ÿ 1.9 mm). To determine the contribution
of cell-autonomous InsR/Foxo1 function, we further generated L 1 mice
with selective over-activation of InsR signaling in POMC neurons (L 1-
Pomc +InsR ), and found that the number of Pomc-positive cells in these
mice was reduced by 10% compared to L 1. Along this line, young adult
mice with POMC-specific deletion of FoxO1 (Pomc DFoxo1 ) showed a 19%
decrease in Pomc cell number compared to wild type controls, but again