Neue Wege in der Diagnostik und Therapie bei dystrophischen

Ergebnisse 63
3. 1. 5 Molekulargenetische Ergebnisse bei CHST6-gekoppelten
Hornhautdystrophien
Alle molekulargenetischen Ergebnisse sind in Tabelle 6 dargestellt. Wir fanden innerhalb des
Exon 3 (kodierender Bereich) des CHST6-Gens bei Familie F1 und den Patienten F2 bis F4
6 Mutationen, 5 Missense-Mutationen und eine frameshift-Mutation, von denen 3 bisher noch
nicht beschrieben wurden.
- Familie F1
Bei Familie F1 fanden wir einen homozygoten Basenaustausch 693T>A im Exon 3 (erste
Position des Startcodons) bei beiden betroffenen Familienmitgliedern F1 II/1 und F2 II/2. Die
nichtbetroffenen Eltern F1 I/1 und F1 I/2 und der nichtbetroffenen Bruder F1 II/3 sind
hetreozygote Träger dieser Mutation. Das Codon 1 kodiert nicht mehr für Methionin, sondern
für Leucin (Met1Leu) (Abb. 26a und b).
Diese Mutation ist bisher in der Literatur nicht beschrieben worden. Aus diesem Grund
führten wir einen zweiten Mutationsnachweis mit dem Restriktionsenzym NSPI (NEB,
Ipswich, MA, USA) durch. Wir fanden bei beiden Schwestern F1 II/1 und F1II/2 mit
homozygotem Genotyp 2 Fragmente mit einer Länge von 171 und 307 Basenpaaren und bei
den 3 Familienmitgliedern F1 I/1, F1 I/2 und F1 II/3 mit einem heterozygoten Genotyp 4
Fragmente mit einer Länge von 48, 123, 171 und 307 Basenpaaren (Abb. 27a). Bei den 100
nichtverwandten Kontrollen fanden wir 3 Fragmente mit 48, 123 und 307 Basenpaaren.
- Patientin F2 und F4
Bei Patientin F2 und bei Patient F4 sahen wir in der direkten Sequenzierung einen
heterozygoten Basenaustausch 1291T>G im Exon 3 (2. Position des Codons 200). Dadurch
kodiert das Codon 200 nicht mehr für die Aminosäure Leucin, sondern für die Aminosäure
Arginin (Leu200Arg) (Abb. 26c). Eine weitere Mutation konnte bei Patientin F2 nicht entdeckt
werden.
Wir fanden jedoch bei beiden Patienten einen heterozygoten Einzelbasenaustausch
1176C>G im Exon 3 (erste Position des Codons 162), Dadurch kodiert das Codon 162 nicht
mehr für die Aminosäure Arginin, sondern für die Aminosäure Glycin (Arg162Gly) (Abb. 26d).
Dabei handelt es sich jedoch weder um eine sogenannte konservierte Region (=im selben
Genabschnnitt bei verschiedenen Spezies gleiche Sequenz), noch um einen
Polaritätswechsel der Aminosäure. Desweiteren wurde dieser Basenaustausch bereits mit
einer Frequenz von 6,3% in der Normalbevölkerung gefunden [Aldave et al. 2004]. Aus
diesen Gründen muß davon ausgegangen werden, dass es sich bei diesem
Basenpaaraustausch um einen Polymorphismus handelt.