b a c - repOSitorium - Universität Osnabrück

3.1 Charakterisierung des Sec61-Komplexes aus Canis familiaris
schaltereignisse verursachten Stromänderungen ergibt Mittelwerte von -8,7 mV für den
Hauptleitwert und -4,7 mV für den Unterleitwert des Kanals aus RM-Präparationen
in KCl-Lösungen (250 mM KCl, 10 mM Mops/Tris pH 7 cis, 20 mM KCl, 10 mM
Mops/Tris pH 7 trans, Abbildung 3.5 a). Daraus ergeben sich Permeabilitätsverhält-
nisse von Chlorid- zu Kaliumionen von P Cl −/P K + = 1,5 und P Cl −/P K + =1,24. Unter
Verwendung von CaCl2-Puffern (10,7 mM CaCl2, 10 mM Mops/Tris pH 7 cis, 184 mM
CaCl2, 10 mM Mops/Tris pH 7 trans, Abbildung 3.5 b) liegen die Umkehrpotenzia-
le nach Korrektur des Liquid junction Potenziales (2.3.5; Barry und Lynch, 1991) bei
42,1 mV und 38,6 mV für Haupt- und Unterleitwert. Diese Werte entsprechen Permea-
bilitätsverhältnissen von P Cl −/P Ca 2+ = 12,4 und P Cl −/P Ca 2+ =10,0.
Wird das Umkehrpotenzial über Spannungsrampen aus den absoluten Strömen be-
stimmt, so kann ebenfalls eine Abhängigkeit der Werte vom Offenzustand des Kanals
beobachtet werden (Abbildung 3.5 c,d,f), die für alle untersuchten Präparationen des
Sec61-Komplexes charakteristisch ist. Dieses Ergebnis ist mit einer früheren elektrophy-
siologischen Untersuchung am Translokon konsistent (Erdmann, 2004). Die mittleren
Umkehrpotenziale und entsprechenden Permeabilitätsverhältnisse für raue Mikrosomen
und den aufgereinigten Sec61-Komplex sind in Tabelle 3.3 zusammengefasst.
Tabelle 3.3: Umkehrpotenziale und Selektivitäten der verschiedenen Proben des Sec61-
Komplexes
Auswertung der Daten aus Strom-Spannungsrampen. n = Anzahl vermessener Bilayer.
Probe Elektrolytbedingungen Urev [mV] ∗ PA/PK n
RM 250 mM KCl zu 20 mM KCl -8,5 ± 7,8 1,5 10
Sec61-Komplex 250 mM KCl zu 20 mM KCl -10,7 ± 10,1 1,6 5
RM 184 mM CaCl2 zu 10,7 mM CaCl2 -32,1 ± 9,3 6,8 8
Sec61-Komplex 184 mM CaCl2 zu 10,7 mM CaCl2 -36,4 ± 5 8,7 5
RM 176 mM MgCl2 zu 10,4 mM MgCl2 -31,4 ± 5,8 6,5 5
Eine Ermittelung des Umkehrpotenziales nach dieser Methode hat im Fall des Sec61-
Kanals den Nachteil, dass die Leckleitfähigkeiten der Pore (3.1.2) mit in die erhaltenen
Werte einfließen. Umkehrpotenziale und Permeabilitätsverhältnisse sind im Vergleich
zur Auswertung aus Einzelkanalschaltereignissen reduziert.
Der Kanal des Translokons zeigt in allen untersuchten Proben unter asymmetrischen
CaCl2- und MgCl2-Elektrolytbedingungen eine deutlich erhöhte Anionenselektivität im
Vergleich zu Experimenten mit asymmetrischen KCl-Lösungen. Es sollte untersucht
werden, ob die im Vergleich geringere Kationenpermeation auf die bivalenten Ionen be-
∗ nach Korrektur des Liquid junction Potenziales bei Verwendung von CaCl2- und MgCl2-Elektrolyten
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