b a c - repOSitorium - Universität Osnabrück

3 Ergebnisse
Tabelle 3.5: Fusionen der RM-Präparationen aus unterschiedlichen Stämmen von S. cerevisiae
+ = osmotische Fusion erfolgreich, (+) = osmotische Fusion vereinzelt erfolgreich,
* = nach zusätzlicher Inkubation mit PPcecA, - = osmotische Fusion nicht erfolgreich,
WT= Wildtyp.
Stamm Fusion nach Puromycin-Behandlung
491 (RSY524) -
492 (RSY255, WT) -
541 (RSY2022, WT) +
542 (RSY2024) -
543 (RSY2025) -
544 (RSY2026) (+)
545 (RSY2027) -
536 (BY4741, WT) -
YBR238C (+)*
YER019C-A (+)*
sen Proben hindeutet. Generell inkorporierten nur die Präparationen des Stammes 541
(RSY2022) in ausreichendem Maße für eine grundsätzliche elektrophysiologische Charak-
terisierung in den planaren Bilayer. Die im Folgenden beschriebenen Kanaleigenschaften
beziehen sich ausschließlich auf Messungen mit Proben des Stammes 541 (RSY2022).
Ein elektrophysiologischer Vergleich der unterschiedlichen Sec61p-Mutanten ist mit den
verwendeten Proben nicht möglich.
3.2.3 Schaltverhalten
Das Schaltverhalten des Kanals aus rauen Mikrosomen aus S. cerevisiae unter symme-
trischen Elektrolytbedingungen (Abbildung 3.19 a) ist, wie das des Sec61-Komplexes
aus C. familiaris, durch eine hohe Variabilität der auftretenden Stromamplituden ge-
kennzeichnet.
Ein bevorzugtes Stromniveau und damit eine energetisch begünstigte Kanalkonforma-
tion kann in den Stromableitungen nicht zugeordnet werden. Der Kanal zeigt deutliche
Unterschiede in den Verweildauern in einem Offenzustand. Neben hochfrequentem Schal-
ten tritt auch eine deutlich langsamere Kinetik mit dwelltimes von mehreren hundert
ms auf. Ein vollständiges Schließen des Kanals ist hingegen nicht zu beobachten. Der
für alle untersuchten Proben des Sec61-Komplexes aus C. familiaris typische Leckstrom
ist somit auch für den Kanal aus rauen Mikrosomen aus S. cerevisiae charakteristisch.
Für eine genauere Betrachtung der Schaltcharakteristika wird der mittlere Strom über
72