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4.4 Umkehrpotenzial und Selektivität
erhaltenen Werten wurde mit Hilfe der GHK-Spannungsgleichung die Selektivität des
Kanals als Verhältnis der Permeabilitätskoeffizienten der beteiligten Ionen bestimmt
(3.1.5). Die ermittelten Werte für die verwendeten Proben sind in Tabelle (4.1) zusam-
mengefasst.
Tabelle 4.1: Verhältnis der Permeabilitätskoeffizienten für Anionen und Kationen für die
verschiedenen Proben des Sec61-Komplexes
Λ1 und Λ2 bezeichnen Haupt- und Unterleitwert bei der Auswertung über Einzelkanalschaltereignisse.
Probe Elektrolytbedingungen PA/PK
RM Λ1 250 mM KCl cis, 20 mM KCl trans 1,5
RM Λ2 250 mM KCl cis, 20 mM KCl trans 1,24
RM 250 mM KCl cis, 20 mM KCl trans 1,5
Sec61-Komplex 250 mM KCl cis, 20 mM KCl trans 1,6
RM Λ1 10,7 mM CaCl2 cis, 184 mM CaCl2 trans 12,4
RM Λ2 10,7 mM CaCl2 cis, 184 mM CaCl2 trans 10
RM 184 mM CaCl2 cis, 10,7 mM CaCl2 trans 6,8
Sec61-Komplex 184 mM CaCl2 cis, 10,7 mM CaCl2 trans 8,7
RM 176 mM MgCl2 cis, 10,4 mM MgCl2 trans 6,5
Alle im Rahmen der vorliegenden Arbeit untersuchten Proben zeigen einen anionen-
selektiven Kanal. Dabei können für Experimente mit KCl-Lösungen Permeabilitätsver-
hältnisse zwischen P Cl −/P K +=1,24 und P Cl −/P K +=1,6 festgestellt werden. Sowohl bei
der Ermittlung des Umkehrpotenziales aus Einzelkanalschaltereignissen wie auch bei
der Datenerhebung mittels Strom-Spannungsrampen zeigt sich eine Abhängigkeit der
Werte vom Offenzustand des Kanals. Diese Beobachtung deckt sich mit den Ergebnis-
sen einer früheren Studie am Sec61-Komplex (Erdmann, 2004). In planar Bilayer- und
Patch-Clamp-Experimenten mit dem Metabolit-Transporter der äußeren Mitochondri-
enmembran VDAC aus Neurospora crassa wurde eine Abhängigkeit der Selektivität
vom Offenzustand mit anionen- und kationenselektiven Kanalkonformationen beobach-
tet (Hodge und Colombini, 1997; Pavlov et al., 2005). Die Proteintranslokase der inneren
Chloroplastenmembran Tic110 aus Pisum sativum zeigt ebenfalls eine Veränderung der
Selektivität mit dem Offenzustand des Kanals (Götze, 2009).
Die Untersuchungen der Translokonpräparationen in asymmetrischen CaCl2-Elektroly-
ten haben im Vergleich zu den Experimenten mit KCl-Lösungen eine deutliche Zunahme
der Anionenselektivitäten mit Werten zwischen P Cl −/P Ca 2+=6,8 und P Cl −/ P Ca 2+=12,4
ergeben. Die Auswertung der Daten über Einzelkanalschaltereignisse zeigt dabei für
raue Mikrosomen höhere Selektivitäten als eine Bestimmung der Werte aus Strom-
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